弧菌显色培养基配方的选定和制备方法

　　

　　弧菌显色培养基用法

　　

　　称取本品18.46g加入200ml蒸馏水，加热煮沸溶解并不停搅拌，加热10-20分钟。冷却至45-50℃时，倾入无菌平皿。

　　

　　注意：制备好的培养基一定要保持表面干燥，可在37℃的培养箱中倒置放置1-2小时。

　　

　　弧菌显色培养基操作步骤

　　

　　1、按国家标准、SN标准、FDA标准或其它方法制备样品液；

　　

　　2、取1ml样品液加入9mlSCPB肉汤或碱性蛋白胨水中，37℃增菌培养18-24小时；

　　

　　3、用3mm接种环取1环增菌液，划线接种到副溶血性弧菌显色培养基上，做2个平板；

　　

　　4、37℃培养18-24h，溶血性弧菌显蓝色至蓝绿色，霍乱弧菌和其它弧菌显无色，其它细菌显黄色或无色且菌落很小；

　　

　　5、对可疑菌落可划线接种到营养琼脂平板上，36±1℃培养12-16小时，挑取单菌落做副溶血性弧菌全套生化试验。

　　

　　弧菌显色培养基制备的基本方法和注意事项

　　

　　1.弧菌显色培养基配方的选定

　　

　　同一种培养基的配方在不同著作中常会有某些差别。因此，除所用的是标准方法，应严格按其规定进行配制外．一般均应尽量收集有关资料．加以比较核对．再依据自己的使用目的加以选用，记录其来源。

　　

　　2．培养基的制备记录

　　

　　每次制备培养基均应有记录，包括培养推各称，配方及其来源．和各种成份的牌号。zui终pH值、消毒的温度和时间制各的日期和制备者等，记录应复制一份，原记录保存备查，复制记录随制好的培养基一同存放、以防发生混乱。

　　

　　3.弧菌显色培养基成分的称取

　　

　　培养基的各种成分必须称取并要注意防止错乱．一次完成，不要中断。可将配方置于傍侧，每称完一种成分即在配方上做出记号，并将所需称取的药品一次取齐，置于左侧，每种称取完毕后，即移放于右侧。*称取完毕后．还应进行一次检查。

　　

　　4.弧菌显色培养基各成份的混合和溶化

　　

　　培养基所用化学药品均应是化学纯的。使用的蒸煮锅不得为铜锅或铁锅，以防有微量铜或铁混入培养基中，使细菌不易生长。使用不锈钢锅加热溶化．也可放入大烧杯或大烧瓶中置高压蒸汽灭菌器或流动蒸汽消毒器中蒸煮溶化。在锅中溶化时、可先用温水加热并随时扰动，以防焦化、如发现有焦化现象、该培养基即不能使用，应重新制备。待大部分固体成分溶化后，再用较小火力使所有成分*溶化．迄至煮沸。如为琼脂培养基，应先用一部分水将琼脂溶化，用另一部分水溶化其它成分，然后将两溶液充分混合。在加热溶化过程中，因蒸发而丢失的水分，zui后必须加以补足。

　　

　　5.培养塞pH的初步调整

　　

　　培养基各成分*溶解后，应进行pH的初步调正，因培养基在加热消毒过程中、pH会有所变化，例如，牛肉浸液约可降低pH0.2.而肠浸液pH却会有显著的升高。因此，对这个步骤，操作者应随时注意探索经验、以期能掌握培养基的zui终pH，保证培养基的质量。pH调正后，还应将培养基煮沸数分钟，以利培养基沉淀物的析出。