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细胞体外培养应注意的方面

更新时间:2019-05-30  |  点击率:2224

细胞培养是很重要的一门技术。其培养效果受到多方面影响,可汇总如下:

 

1、温度。细胞生长需要适宜的温度。通常来说,人和哺乳动物的细胞培养温度要在35-37℃,鸟类细胞培养在38.5℃较好,鼠类细胞在34℃适宜生长。细胞对低温的耐受力比高温强。

 

2、分离方法

常用的分离方法有组织块分离法和酶消化分离法。也有使用抗体或磁珠包被的抗体分离细胞。

 

3、培养液

1)血清:细胞培养时血清的浓度要控制在5%~20%,过高或过低的血清浓度都不利于细胞的生长和增殖。当然,也可以使用特别配制的商品化的无血清培养基。

 

2)激素和生长因子:不同的细胞需要不同的激素和因子。常见有:雌二醇、孕酮、表皮生长因子、成纤维细胞生长因子。许多激素和因子对细胞有促增殖、分化作用。

 

3)抗生素:常用的抗菌素是青霉素和链霉素。此外,卡那霉素、新霉素、两性霉素、氯霉素、潮霉素都可以防止细胞培养过程中细菌和真菌的感染。

 

4)支持物:有些贴壁细胞需要特定的支持物。常见的支持物有滋养细胞或生长基质(如胶原等)。

 

4、接种的细胞密度:细胞密度过高和过低均不利于细胞生长。

 

培养液的pH值:不同种动物或是同一种动物的不同部位对pH的要求各不相同。一般情况下,动物细胞培养液的pH值一般在7.2-7.4。除文献报道外,自己也可进行摸索。如培养瓶盖已松口,与外界气体存在交换,培养箱内的CO2浓度以及培养液中的缓冲盐成分及浓度也可影响培养液的pH值。

 

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参考文献

黄兰兰,等. 影响动物细胞体外培养因素. 黑龙江动物繁殖. 2005,13(4):16-19