当前位置:首页  >  技术文章  >  三种HiMedia显色培养基的性能评估

三种HiMedia显色培养基的性能评估

更新时间:2019-07-18  |  点击率:1031

2013年,在《环境与可持续发展期刊》上,埃及国家研究中心水污染研究部及扎加齐克大学(Zagazig)微生物学系对HiMedia公司生产的三款显色培养基的性能进行了评估。这3款显色培养基分别为:

 

1)HiCrome Aureus Agar Base及添加剂

2)M-CP Agar Base及添加剂

3)HiCrome Candida Differential Agar及添加剂

 

它们分别用于检测水中的金黄色葡萄球菌、产气荚膜梭菌和白色念珠菌。研究人员对HiMedia的显色培养基的灵敏度、特异性和检测阈限进行了评估。他们总共检测了140个水的样品,包括40个地下水水样,70个尼罗河河水样本,20个废水样本,10个海水样本。分离的阳性菌落用PCR方法进行了确证。结果显示,这些显色培养基快速、特异、灵敏。

 

研究人员之所以开展这项研究,是因为尽管美国APHA于2005年发布了水和废水检验的美国标准方法,但仍存在一些相关问题,如病原体的难以鉴定,鉴定和分型所花的时间较长,支出较多。另外,水体需要长期监测病原体,这需要较好的监测方法和筛查程序。显色培养基现在已逐渐被接受,并被纳入了标准方法。显色培养基的种类和品牌也越来越多,一个显色培养基有时会采用多种显色剂,例如针对不同酶的产生绿色和红色的显色剂,这样可形成绿色、红色和紫色菌落。

 

在HiMedia这三种显色培养基中,金黄色葡萄球菌显色培养基在35-37℃孵育24-48小时,结果显示,金黄色葡萄球菌为棕黑色菌落,有透明带。M-CP培养基为厌氧培养44℃24-48小时,产气荚膜梭菌菌落为黄色菌落,并在接触氨气后30秒内变为粉红色。念珠菌显色培养基培养30℃,40-48小时,白色念珠菌为淡绿色平滑菌落。由于均为水样本,研究人员采用的是膜过滤的方法,滤膜孔径为0.45m。研究人员用无菌镊子将滤膜放到滤器上进行样本过滤,再将可能含有致病菌的水样过滤后的滤膜放到无菌平板上培养。

 

结果显示,对于金葡菌显色培养基的假阴性率和假阳性率均为0, 棕褐色为阴性菌;M-CP培养基上的绿色菌落为阴性菌落;念珠菌显色培养基上,每90个菌落中就有9个为浅绿色阳性菌落,假阴性有1个(假阴性率为10%),为蓝色菌落,假阳性率则为0。研究人员还发现,不存在非典型菌株显示典型菌株的典型颜色。终结论是,金葡和M-CP的灵敏度和特异性均为100%,而念珠菌显色培养基灵敏度为90%,特异性为100%。

 

研究人员还就140个不同水样的检测结果进行了统计,得出显色培养基对于不同水样的灵敏度和特异性,见下表:

 

培养基

水类型

阳性菌落

阴性菌落

灵敏度(%)

特异性(%)

(n)

真阳性n(%)

假阳性n(%)

(n)

真阴性n(%)

假阴性n(%)

金黄色葡萄球菌显色培养基

地下水

12

11(91.7)

1(8.3)

6

6(100)

0(0)

100

85.7

尼罗河河水

70

67(95.8)

3(4.2)

11

10(90.9)

1(8.9)

98.5

76.9

废水

20

20(100)

0(0)

13

13(100)

0(0)

100

100

海水

10

9(90)

1(10)

3

3(100)

0(0)

100

75

梭菌显色培养基

地下水

9

8(88.9)

1(11.1)

5

5(100)

0(0)

100

83.3

尼罗河河水

45

41(91.2)

4(8.8)

10

9(90)

1(10)

97.6

69.2

废水

20

19(95.0)

1(5))

5

4(80)

1(20)

95

80

海水

5

5(100)

0(0)

2

2(100)

0(0)

100

100

念珠菌显色培养基

地下水

2

2(100)

0(0)

2

2(100)

0(0)

100

100

尼罗河河水

62

60(96.8)

2(3.2)

8

7(87.5)

1(12.5)

98.4

77.8

废水

20

19(95.0)

1(5.0)

5

4(80)

1(20)

95

80

海水

13

11(84.6)

2(15.4)

4

4(100)

0(0)

100

66.7

 

 

关于检测阈限,研究人员分别用不同浓度的标准菌落掺入到水样品中测试(具体浓度包括1-20CFU/100mL、20-80CFU/100mL、80-500CFU/100mL)。结果显示,三种显色培养基的对目标微生物的检测阈限均小于20CFU/100mL,检测阈限很低。

 

作者认为,传统的水样病原菌的检测和计数方法非常耗时,且需要大量的确证试验。并且,仍然需要快速灵敏的水中病原微生物的检测手段,特别是对于饮用水。研究人员指出,HiMedia的金黄色葡萄球菌显色培养基,性能甚至优于市面上的科玛嘉显色培养基(科玛嘉显色培养基的灵敏度为76%,特异性为90%)。

 

后,作者归纳说:总之, Mediad的这三款显色培养基非常适合用于常规的实验室日常工作,特别是它不需要任何的确证试验。

 

HiMedia显色培养基显色结果图(仅供参考)

 


图1. HiCrome Aureus Agar Base(货号M1468)

 

 


 

图2. M-CP Agar Base(货号M1354)

 


图3. HiCrome Candida Differential Agar(货号M1297A)

 

 

参考文献

 

Raed S. Al-Wasify, Al-Sayed A. Al-Sayed and Mohamed M. Kamel. Sensitivity and Specificity of Chromogenic Media for Detection of Some Pathogens in Water. International Journal of Environment and Sustainability. 2013,2(1):1-9