前面几期内容给大家总结了如何判断在培养过程中,细胞有没有被支原体污染,还没看的小伙伴点击下方传送链接即可到达。
DIY判断细胞的支原体污染
支原体实验室检测方法大PK
今天就来唠唠,怎样处理细胞的支原体污染。
由于每个人的实验以及样品情况不一样,所以处理方法也需要分情况讨论,给大家简单列举几个场景,便于理解。
Vol.1
情景一:实验刚开始且细胞不那么贵重
实验刚刚开始,所用到的细胞也不贵重。培养了几代发现细胞状态不对劲,一检测发现,不幸感染了支原体。
对于这种情况,我们的建议是,直接把细胞连同用过的试剂一起丢掉,并对空间和器械进行支原体祛除的处理(后文会将具体方法)。
毕竟细胞用的支原体祛除试剂也不便宜,而且需要的时间也不算短,搞科研是个费钱费时间的活,要会精打细算。
处理方法:扔掉样本并清洁空间和器械
处理难度:
Vol.2
情景二:细胞经过特殊处理不愿放弃
用到的细胞虽然不算特别珍贵,但实验已经开始一段时间了,倾注了时间和心血的。细胞经历了转染或者体外刺激,好不容易扩增起来,好几盘细胞,难道要一夜回到解放前吗?当!然!不!可!以!
是时候展示真正的技术了!推荐大家使用MB公司的专li符合抗生素Zell Shield®
按照以下使用说明对细胞进行处理:
1、在每次使用Zell Shield®之前,细胞传代时,先使用厂家推荐的“悬浮冲洗法"处理好细胞,再使用加了Zell Shield®的培养基养细胞,能达到最佳的祛除支原体的效果。
2、Zell Shield®常规为-18℃保存,使用前先融化分装,后续依旧-18℃避光保存,使用时按需融化配置。避免反复冻融。
3、Zell Shield®按1:100浓度可直接加入培养基(例如:500ml培养基中添加5ml Zell Shield®,50mL/瓶的Zell Shield®可供5L培养基使用)。
处理方法:Zell Shield®处理细胞
并清洁空间和器械
处理难度:
Vol.3
情景三:细胞本身就非常珍贵不能丢
有时候会遇到一些特别珍贵的细胞或是病毒样品,即便是污染了也希望可以拯救一下,减少损失。
针对细胞不同的特性,处理方式也有些许区别:
一、短时间内就要收样的病毒或细胞样品:
可以用德国MB公司的Mynox® 对样本进行快速清除。
它来自枯草芽孢杆菌提取物,可以特异性地与支原体膜结合,改变其通透性,能够在2-3小时内快速清除支原体,使用方法如下:
二、需要长期培养、保存的样本:
可以用Mynox® Gold对样本进行*清除。
它是上面Mynox®的升级版,配合自带的「巩固防护液」,可以在后续的培养中(约1个月)持续发挥杀灭支原体的作用,并预防支原体生长,适合需要反复传代、长期保存的珍贵细胞,方法如下:
以上两种方法搭配支原体环境祛除产品一起使用,消灭支原体更*,防止复发!
处理方法:Mynox®或Mynox® Gold
并清洁空间和器械
处理难度:
Vol.4
情景四:环境中的支原体祛除
讲真,实验用的支原体祛除试剂属实不便宜,为了不给支原体卷土重来的机会,最好同时把实验环境中的支原体也一起消灭(试验台、超净台、培养箱、液氮罐、移液器),常见的有以下这些方法:
顺便用Water Shield™把培养箱和水浴锅的水槽也一并清洁了,保持水源的洁净。
处理方法:使用专门的环境用支原体祛除试剂
处理难度:
虽说现在市面上各种各样的支原体清除产品层出不穷,但避免污染的最好方式还是注意实验规范以及定期清洁,最后希望大家的实验都顺顺利利,原理污染。
MB产品最新到货,包括支原体检测、祛除相关试剂,可以戳戳链接了解详情:2021海外到货第七波