细胞培养之支原体检测方法~支原体检测qPCR

在生物制品和细胞治疗领域，支原体检查是保证产品和治疗安全的重要一环。生物源性原材料、采用细胞培养技术制备的疫苗、抗体，以及细胞或基因治疗产品在生产过程的不同阶段都要进行支原体污染的检查

接下来，本小助将为大家讲解各种支原体检测的方法比较。

一， 支原体荧光定量PCR,即qPCR.

其原理是一种在DNA扩增反应中，以荧光化学物质测每次聚合酶链式反应（PCR）循环后产物总量的方法。通过内参或者外参法对待测样品中的特定DNA序列进行定量分析的方法。

它的优点是准确度很高，特别是德国MB的试剂盒，灵敏度可以达到10CFU/ml以上。

特异性强，*涵盖所有可能感染细胞的支原体物种（涵盖欧洲药典规定的9种支原体），根据序列一致性，至少可以检测到107种支原体物种。与细菌和真核DNA无交叉反应。

操作简单，只需配备qPCR仪。

时间短，2-3小时可以出结果。

唯yi的限制，因为检测的是支原体的DNA，所以无法区分活的支原体。但生物制品在生产过程中，本身不应该产生支原体污染，污染过也不行，所以这个限制反而变成了优点。