当前位置:首页  >  技术文章  >  快速检测RNA病毒,德国MB助力科研

快速检测RNA病毒,德国MB助力科研

更新时间:2023-06-13  |  点击率:373

实验室中,如何快速检测RNA病毒?德国MB生产的ConviFlex™RT-Taq Mix是一种冻干通用RT-PCR主混合物,专为RNA分子的定性检测和分析而设计,特别适用于RNA病毒的检测。

 

ConviFlex™RT-Taq Mix是一种即用型一步RT-PCR试剂盒,包含MuLV逆转录酶,热启动Taq聚合酶和dNTPs在冻干主混合物中。用随附的2倍补液缓冲液重组后,ConviFlex™RT-Taq Mix包含RT-PCR扩增所需的所有核心成分。

  

除了RNA模板和引物。这可以大大减少设置RT-PCR反应所需的移液步骤,动手时间和交叉污染的风险。

 

ConviFlex™RT-PCR Mix中包含的Taq聚合酶具有热启动功能。即使在环境温度下,其活性也会在PCR过程中被抗taq DNA聚合酶抗体阻断。当温度升高到70℃以上时,这种抑制作用在变性过程中被逆转,导致Taq聚合酶被激活。因此,非特异性PCR产物和引物二聚体的形成被强烈抑制,导致PCR反应具有更高的特异性、更高的灵敏度和更高的产量。混合物中包含的逆转录酶是一种转基因的小鼠白血病病毒(M-MuLV)ConviFlex™RT-PCR Mix可以很容易地适应大多数RT-PCR协议,程序和循环器类型。因此,本文档中的RT-PCR设置和协议仅是RT-PCR系统的建议。最佳体积、浓度、温度和孵育时间可能因您的具体应用而有很大差异,应根据您自己的分析要求进行调整。

 

ConviFlex™RT-Taq Mix可用于真核、原核、病毒RNA和体外转录RNA的反转录和PCR扩增。使用市售的RNA提取试剂盒(参见ExtractNow™RNA Mini kit Cat),可以从组织、拭子和活组织、哺乳动物细胞和细菌等不同的起始材料中提取RNANo. 603-1050ExtractNow™病毒RNA Kit Cat编号611-1010/-1050/-1250)或建立良好的提取方法。RNA制备必须不含RT-PCR抑制剂,如有机溶剂等。提取的RNA的降解极大地限制了RT-PCR反应的性能。尽量减少RNA样品或RNA酶污染的冻融循环次数有助于防止RNA降解。DNA污染也会降低RT-PCR的产率。