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新生牛血清蛋白成分对细胞培养有何影响?

更新时间:2023-07-03  |  点击率:253

牛血清是常用的细胞培养类添加物,其中含有丰富的营养成分,如蛋白质、生长因子、激素、营养物及代谢物、脂类、矿物质等,为细胞培养的顺利进行提供必要的营养保障,尤其是新生牛血清的应用较为广泛。

 

动物血清中含有丰富的营养成分,如蛋白质、生长因子、激素、营养物及代谢物、脂类、矿物质等,为细胞培养的顺利进行提供必要的营养保障,尤其是新生牛血清的应用较为广泛。有科研人员通过凝胶过滤层析,以及MTT比色法没分析新生牛血清中蛋白情况、对细胞培养的影响。

 

结果显示:

 

通过层析柱后,能分辨出血清中的蛋白组分相对比较单一,该血清来源于新生牛。新生牛血清和成年牛血清在蛋白组分上是有差别的,而凝胶层析就是利用蛋白组分的大小不同来反映出不同的峰值来加以区分的。因此,如果选择合适的层析柱,可以将血清中的不同组分区分出来,从而判断商品新生牛血清中是否含有非新生牛血清的成分,间接评价血清的质量。

 

MTT比色法的原理是根据MTT能被活细胞线粒体中脱氢酶还原成蓝紫色结晶甲瓒,并沉积于细胞中,而死细胞则不能引起这种变化。甲瓒经DMSO溶解后,可直接在酶标仪上读取光吸收值,根据光吸收值的大小来判断活细胞线粒体中脱氢酶与MTT结合的量,在一定范围内MTT结晶物的形成量与活细胞数量有线性关系,是定量检测细胞增殖和生长的理想方法,依此原理来判断培养细胞的活力和增殖状况。本试验通过MTT比色法评价新生牛血清、成年牛血清和商品血清对成纤维细胞和骨髓瘤细胞的促生长作用,来判断血清的质量状况。通过细胞培养增殖的结果比较差异显著,说明了蛋白组分是影响细胞培养的重要因素。蛋白组分上看是相对单一的,具有较好的促细胞生长作用,成牛血清蛋白组分上看区别较大,其促细胞生长作用不明显。

 

在细胞培养过程中,细胞出现不增殖或者增殖不明显的原因很多,其中血清质量的选择是不可忽视的重要因素。生产中血源及生产流程的差异,导致了商品血清在实际应用中存在一定质量上的差别。Ausbian进口新生牛血清,澳洲血源,富含各类营养成分。