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血清说明书——储存、解冻、使用方法

更新时间:2023-07-14  |  点击率:479

一、血清的储存


1、长期储存:

血清在生产制备完成后,通过质量检测,然后被运送至市场上销售。整个过程中,包括运输流程,储存温度应严格保证在-20℃,避免反复冻融影响血清活性。

实验人员在收到血清,检查完好后,及时将血清送至-20℃冰箱中储存,用时再取出采用三步法解冻。

在未解冻的情况下,血清可长期储存在在-20℃或-80℃环境中,只要是在保质期内,均能正常使用。

储存过程中,需要定期监控储存血清的冰箱中,温度是否符合规定,保证冰箱制冷效果(-20℃)是否正常,尽量避免出现温度大幅度的波动的情况,防止血清因温度变化而反复冻融的情况出现。

另外,尽量将血清独立存放于一定区域(恒温区域),避免反复开关冰箱门对储存温度造成影响。


2、在4℃冰箱中的储存:

解冻后的血清,不宜在4℃冰箱中放置过久。

血清在生产加工运输过程中,没有添加外源抗菌成分。因此开封后,如果长期保存在使用频率高且洁净度差的4℃冰箱中,很容易染菌。

如果配制为培养基,添加了双抗,可以在一定程度上减少培养基污染的风险,但是由于基础培养基的添加,使得整体成分更为复杂,保存不当则会使有效物质活性降低。

因此,我们建议,添加了血清的培养基尽量做到现配现用;解冻后的血清不要长期储存在4℃冰箱中,尽可能不要超过7天。


二、血清的解冻

当血清需要被解冻时,我们不建议大家把刚从-20℃中拿出的冰冻血清,直接放入4℃冰箱中过夜融化,也不要在室温进行过夜解冻。

由于血清含有蛋白质等干物质,这类物质容易先融化析出,水这类溶剂后融化,导致血清产生沉淀,影响使用效果。

因此,要尽可能保证所有成分同步融化,因此我们建议使用三步法融化,具体步骤见下表。

需要注意的是,如果血清是储存在-80℃冰箱中,三步法解冻前,应先将血清转移至-20℃冰箱中存放1-2天。

一次解冻后,分装至无菌离心管中,尽量保证每管是一次的用量,分装管解冻也遵循三步法,解冻后需全部用完。




三、血清的使用

1、血清的热灭活:

血清进行热灭活的目的是,利用较高的温度使补体失活。由于胎牛血清会严格控制采血时间为5-8月龄的胎牛,此时还未形成完整的补体系统,因此,合格的胎牛血清,是不需要灭活的。

但是实验中如果需要新生牛血清、小牛血清、猪血清或马血清这些血清时,则需要根据实验要求而定。

根据血清厂家多年来总结的经验,常规解冻后,40℃水浴加热20分钟即可,能够尽可能地保留营养成分。

2、细胞培养的应用:

对于新的细胞系或从无血清培养转变到胎牛血清培养的细胞系,需要进行适应期。在初始适应期,可以将血清浓度逐渐降低,直到细胞适应无血清培养为止。

3、关注血清的批次:

相同品牌的胎牛血清,在蛋白质含量等方面,可能会存在批次差异,因此在同一实验中最好使用来自同一批次的血清,以减少变异性。如果不得不使用不同批次的胎牛血清,请进行验证实验以确保结果的可重复性。




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