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保障细胞培养实验顺的关键要点:如何进行前期准备

更新时间:2023-09-25  |  点击率:332

工欲善其事,必先利其器。想要做好细胞实验,前期的准备很重要。

 

1、选择正确的培养基

 

在养细胞之前,就要了解,你所养细胞的来源以及种类和名称。

 

选择正规途径来源的细胞,索取细胞培养条件,并查阅文献,确定所需培养液种类以及是否需要添加特殊成分,常用的细胞培养液有DMEMRPMI1640F12等等,一些常见的细胞基本可以使用这几种培养基中的一种来培养,有的需要加入一定其他成分,这需要根据不同的细胞类型,查ATCC细胞库或者查文献,才能找到所需最佳培养液。选择正确的培养液是养好细胞的第一步。

 

2、了解细胞的生长习性

 

不同的细胞生长习性不同。如成纤维细胞是贴壁生长,有一定的密度依赖性,密度小可能会出现不增殖,状态差的情况,接种密度大时则需要隔天传代,频繁传代则影响细胞状态;再如RPMI-8226人多发性骨髓瘤细胞,是悬浮生长的,传代需离心弃去上清即可。总之,了解细胞生长习性,再加上正确的计数,才能掌握好传代的密度。

 

3、准备无菌环境

 

千里之堤溃于蚁穴,细菌、真菌、支原体等微生物的生长速度块和破坏力强,会破坏细胞结构,影响实验结果。使用紫外线照射、定期用专用试剂进行实验室清洁等,都有助于降低细胞污染的风险。

 

4、选择优质的血清

 

血清中含有细胞生长所必须的生长因子,作为哺乳动物细胞培养的附加物,血清的添加是十分重要的,因此,选择优质的血清,是细胞培养成功与否的关键!Ausbian进口胎牛血清,内毒素含量低,澳洲血源,全程冷链运输,为细胞培养保驾护航。