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如何用胎牛血清配制细胞培养液?

更新时间:2023-10-29  |  点击率:323

配制细胞培养基(Cell Culture Medium)时,常使用胎牛血清(Fetal Bovine SerumFBS)作为关键成分之一,因为它含有丰富的生长因子、蛋白质和养分,对细胞的生长和繁殖非常有益。以下是配制细胞培养基时使用胎牛血清的一般步骤:

 

材料准备:

 

适当的细胞培养基基础(例如,DMEMRPMI-1640MEM等)。

胎牛血清(FBS)。

双抗溶液(选加)

步骤:

 

消毒操作: 在无菌工作台下,确保所有用具和试剂都是无菌的,以防止细胞培养的污染。

 

血清选择: 决定所需的FBS浓度。通常,FBS的最终浓度在培养基中约为5%10%。要注意,不同类型的细胞可能需要不同的FBS浓度。一些特殊细胞培养可能需要更低的FBS浓度。

 

配制培养基: 将血清用三步法解冻,根据您所选择的基础培养基的要求,将FBS添加到基础培养基中。通常,将FBS添加到基础培养基的体积比例为5%10%

 

添加补充物: 根据您培养的细胞类型,可能需要添加额外的补充物,如非必要氨基酸、维生素、双抗溶液等。确保按照相关实验室方案或文献中的建议添加这些成分。

 

混匀: 使轻柔混匀,确保FBS和其他成分均匀分散在培养基中。

 

保存: 将培养基存储在4°C的冰箱中,避免阳光直射,以延长其保存时间,尽量在1周内用完。

 

请注意,不同类型的细胞可能需要不同的培养基成分和培养条件,因此在开始实验前,应仔细了解您正在培养的特定细胞类型的培养需求,并根据需要进行定制化的培养基配制。此外,细胞培养过程中的无菌操作非常重要,以防止细胞培养的污染。