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新研究揭示不同细胞对胎牛血清的要求不同

更新时间:2023-12-13  |  点击率:211

与传统的动物模型相比,体外的细胞培养模型相对操作简便,实验结果重复性也相对更高。.自20世纪50年代以来,胎牛血清作为常用、高效的添加物,在世界范围内被广泛应用于体外细胞培养。

 

胎牛血清,是由胎牛血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物,含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等,其组成成份大部分已知,但还有一部分尚不清楚,这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。其中不含细胞、纤维蛋白和凝血因子。胎牛血清在细胞培养方面通常优于其他类型的血清。由于胎牛从未接触过外界,与新生牛和小牛血清相比,抗体含量明显降低,故抗体与培养细胞发生交叉反应的风险也较低,是理想的细胞生长补充剂。

 

近日的一项研究,探究了细胞培养与胎牛血清的关系。

 

该项研究中,无论采用国产还是进口的胎牛血清培养Sp2/0其细胞克隆数、细胞数量和细胞活率差异均无统计学意义(P0.05).这与已有的研究结果相类似.究其原因可能是Sp2/0MDCK同属细胞系,部分遗传物质已发生改变,且带有癌变的特点,能在体外培养条件下无限制地传代,对血清的依赖降低,因此能在各类型血清中较好地生长增殖.研究中还发现:进口胎牛血清培养的猪胎儿成纤维细胞,其细胞克隆数、细胞数量和活率均极显著高于国产胎牛血清(P<0.01)有科研人员利用不同来源胎牛血清培养骨髓间充质干细胞,发现在使用FBS1培养过程中,骨髓间充质干细胞逐渐死亡,而FBS2培养的骨髓间充质干细胞不但能很快贴壁和迅速增殖,而且传代培养后能保持很强的分裂增殖能力.推测可能是因为猪胎儿成纤维细胞与骨髓间充质干细胞属于原代细胞,保持了体内的生物学特性.因不同来源胎牛血清,其采集方式与生产加工工艺不同,所含促细胞生长因子等活性物质的组份与比例也有所不同,导致原代细胞的生长、增殖受血清来源影响较大。

 

不同来源胎牛血清质量差异大,即使同一品牌、同一货号,因供血动物性别、生理、营养等条件不同,也会存在批次间的差异。该研究利用猪胎儿成纤维细胞对同一品牌、同一货号,3个不同批次的胎牛血清进行了测试,结果显示:FBS2-1形成的细胞克隆小,且细胞克隆数极显著低于FBS2-2FBS2-3P<0.01);培养10d后,FBS2-1的细胞数量和细胞活率极显著低于FBS2-2FBS2-3P<0.01),虽然FBS2-2的细胞克隆数极显著低于FBS2-3P<0.01),但是FBS2-2的细胞克隆大,且细胞数量极显著高

FBS2-3P<0.01).该项实验筛选出FBS2-2是猪胎儿成纤维细胞的适宜血清。

 

由此实验可以看出,不同细胞对于胎牛血清的要求不同,不同批次、品牌的胎牛血清培养效果也不尽相同,在选购时,需要尽量选择可提供试用服务的品牌,在小范围内,对细胞进行培养实验,已选择更符合实验要求的胎牛血清。