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活细胞动态信号网络的新型成像研究,Ausbian血清助力细胞生物学研究

更新时间:2023-12-15  |  点击率:164

细胞培养是研究细胞生物学的基础,胎牛血清作为重要的细胞培养试剂,在细胞培养过程中发挥着重要作用。Ausbian进口特级胎牛血清,内毒素含量低,适合各类细胞生长繁殖。

 

绿色荧光蛋白(GFP)是一种常用的用于观察细胞内部的具体活动蛋白,将GFP序列搭载在能结合目标分子的基因序列后,就能形成用于指示目标存在状态的报告基因。在细胞内部中,报告基因与目的基因相连后,就能通过绿色荧光来显示目标产物的信号。

 

近日,科研人员开发了一种多路复用策略,该策略使用自组装肽在活细胞中随机但稳定的点聚集现有的遗传编码动态荧光报告,这种空间复用成像(SMI)策略可以测量存在于每个集群位置的蜂窝信号,具有比频谱复用更大的复用容量。

 

然而,考虑到其报告身份编码的空间性质,SMI不能用于可视化活细胞或细胞器中蛋白质的组织,也不能可视化响应刺激的蛋白质运动。SMI也不能容易地测量由存在的蛋白质量所指示的变化,如细胞基因表达或局部蛋白质翻译。然而,利用空间作为一种资源来促进smi成像——这是其他成像发展(如扩展显微镜)中使用的主题——提出了一个问题,即是否可以利用其他非常规资源(如时间)来增加活细胞中同时可观察到的信号数量。

 

科研人员在此次研究中,通过使用具有不同时钟特性的荧光团,来指示不同的细胞信号,一个简短的视频(在几秒钟的时间内拍摄)记录了每个像素处荧光的时间信息,可以使用标准解混线性代数进行反转,以产生该像素处的单个信号幅度。每个像素处的信号幅度仅仅是系数乘以每个荧光团的标准时间波动迹,当以加权形式求和时,就构成了在该像素处获得的记录迹。

 

科研人员在这里使用具有不同关闭速率的可逆光开关FPs (rrsfp)来实现时钟效果,尽管原则上任何时间波动的信号都可能适用于这一概念。研究表明,暂时复用成像(TMI)可以支持更多的信号一次成像比传统的光谱复用可行的传统显微镜上使用遗传编码试剂,揭示细胞周期蛋白之间的关系,以及不同的激酶活性之间的关系。TMI不需要任何硬件,除了标准的荧光显微镜,通常提供给生物学家,并使用遗传编码荧光报告,适合标准的生物学工作流程。