上皮细胞是抵御病原体入侵的主要防线。然而,细菌病原体具有破坏这一屏障并促进细菌迁移的能力。然而,结核分枝杆菌(M.tb)在这一过程中所采用的具体分子机制尚不清楚。
在吸入气溶胶颗粒后,细菌往往在肺部形成持续感染,导致特征性肺结核综合征的发展。此外,结核分枝杆菌可以突破肺泡屏障,从而引发肺外结核。结核分枝杆菌的发病机制严重依赖于全身传播,尽管其确切的潜在机制尚未阐明。
肺泡上皮屏障由紧密连接和粘附连接组成,在抵御病原体入侵方面起着重要的作用。在近日发表的一项研究中,科研人员提出了,关于结核分枝杆菌胞外丝氨酸蛋白酶Rv2569c的重大发现,该酶通过e -钙粘蛋白的裂解促进细菌的转运。文章标题为:“Serine protease Rv2569c facilitates transmission of Mycobacterium tuberculosis via disrupting the epithelial barrier by cleaving E-cadherin"
实验结论:
科研人员通过评估Rv2569c切割e -钙粘蛋白的能力,来研究Rv2569c在结核分枝杆菌易位中的作用。e -钙粘蛋白是细胞-细胞粘附连接的重要组成部分,在细菌入侵期间被破坏。利用在大肠杆菌中表达并通过亲和层析纯化的重组Rv2569c,实验证明了Rv2569c具有细胞壁相关丝氨酸蛋白酶活性。
此外,Rv2569c能够降解一系列蛋白质底物,包括酪蛋白、纤维蛋白原、纤维连接蛋白和e -钙粘蛋白。
科研人员还确定了Rv2569c蛋白酶活性的适宜条件是温度为37℃,pH为9.0,MgCl2存在。为了研究Rv2569c在结核分枝杆菌中的功能,科研人员制备了Rv2569c的缺失突变体及其补充菌株,并将其用于感染A549细胞和小鼠。
A549细胞感染实验结果显示,Rv2569c具有裂解E-cadherin的能力,促进M.tb通过极化的A549上皮细胞层迁移。此外,体内感染实验表明,Rv2569c可以破坏E-cadherin,增强M.tb的定植,并在C57BL/6小鼠的肺部引起病理损伤。
总之,这些结果强烈表明结核分枝杆菌利用丝氨酸蛋白酶Rv2569c破坏上皮防御,并通过跨越上皮屏障促进其全身传播。
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