最终分化的细胞可以通过谱系重编程产生,然而,谱系重编程受到原始细胞身份和部分功能残留的转化的阻碍。
2019年,发布在《Cell Resarch》上,标题为:“A two-step lineage reprogramming strategy to generate functionally competent human hepatocytes from fibroblasts"的文章,通过模拟自然再生途径展示了一种新的重编程策略,该策略允许生成可扩展的肝祖细胞和具有功能能力的人肝细胞。
成纤维细胞被诱导为人肝祖细胞样细胞(hhplc),该细胞能在体外稳定扩增并在体内高效移植。此外,hhplc可以在体外有效地诱导成成熟的人肝细胞(hiHeps),其分子特征与原代人肝细胞(PHHs)高度相似。最重要的是,hiHeps可以大量生成,并且在功能上能够取代PHHs进行药物代谢估计、毒性预测和乙型肝炎病毒感染建模。该项研究结果强调了祖细胞阶段对成功的谱系重编程的优势。这一策略有望通过谱系重编程产生其他成熟的人类细胞类型。
本实验中,对人胚胎皮肤的处理,用镊子将人胚胎皮肤组织切碎,在1 mg/mL胶原酶IV (Gibco)中37℃孵育1 - 2小时。酶处理后,离心收集细胞,用HEF培养基(含10%胎牛血清(FBS, Ausbian)、1%谷氨酰胺(Gibco)、1%非必需氨基酸(NEAA, Gibco)和1%青霉素/链霉素(PS, Gibco)的Dulbecco改良Eagle培养基(DMEM, Gibco)重悬。将细胞置于10 cm的组织培养皿中,用HEF培养基培养。
Ausbian进口胎牛血清,内毒素含量低,通过各种质量检测与无菌检测。新批次在试用前,提供试用服务,养细胞更放心。