细胞支原体是细胞培养中最常见的污染源之一,由于其无细胞壁、体积小、容易感染并隐藏在细胞内,支原体污染对细胞培养实验的影响极为严重。支原体污染不仅影响细胞生长、增殖和形态,还会干扰实验结果的可靠性,甚至导致数据全失真。因此,开发和使用有效的支原体清除试剂,成为确保细胞培养质量、避免实验失败的重要举措。

1.抗生素杀灭法
许多工作原理是通过抗生素的作用来清除培养中的支原体。常见的抗生素如四环素、庆大霉素、青霉素等,能够有效抑制支原体的生长和繁殖。
2.特异性靶向法
近年来,研发了针对支原体特定酶和蛋白的靶向清除试剂,这类试剂通过靶向支原体的特定酶活性,抑制其生长或直接破坏其结构,从而有效消除支原体污染。
3.化学清除法
一些使用特定的化学物质,如聚合酶抑制剂、细胞壁合成抑制剂等,通过改变支原体的代谢途径,降低其活性,从而达到清除污染的效果。
关键成分:
1.抗生素
例如,四环素类、氨苄青霉素等抗生素,可有效抑制支原体的生长。
2.溶剂和缓冲液
用于溶解抗生素,保持试剂的稳定性并提供适宜的pH环境,确保其能够与支原体充分接触并发挥作用。
3.细胞保护成分
为了保护细胞免受清除试剂的毒性影响,一些清除试剂还会添加细胞保护成分,如牛血清白蛋白(BSA),来减少对细胞的伤害。
4.指示剂
部分清除试剂含有指示剂,能够在支原体被清除后变色或发光,帮助实验者判断清除效果。
支原体清除试剂的使用注意事项:
1.剂量和使用周期
使用时,需严格按照产品说明书要求的剂量和周期进行操作,过量使用可能对细胞造成不良影响,过少使用则可能无法全清除支原体。
2.操作环境
在使用时,应在无菌环境下操作,避免二次污染。
3.细胞状态监测
在使用清除试剂后,应密切观察细胞的生长状态,包括增殖速度、形态变化等,确保清除过程没有对细胞产生负面影响。
4.长期使用的风险
长期使用同一类清除试剂可能会导致细胞对其产生抗性,影响清除效果。建议周期性更换试剂或采用不同机制的清除试剂。