细胞培养新手避坑指南~无菌操作

细胞培养是生物科研基础核心操作，新手常因细节疏漏导致细胞污染、状态异常，不仅浪费样本与时间，更会影响后续实验进度。结合实操经验，梳理新手高频踩坑点及规避方法，帮大家快速建立规范操作逻辑，保障细胞培养稳定性。

无菌操作：细节失守=污染高发，这些误区别踩

无菌环境是细胞培养的核心前提，新手常因操作不规范引发细菌、真菌、支原体污染，多数问题源于细节疏忽：

1. 超净台使用：开机后需紫外线消毒30分钟以上，消毒后等待紫外线关闭、通风片刻再操作，避免紫外线残留损伤细胞；操作时手臂需在超净台内指定区域活动，避免跨越无菌区，实验用品摆放有序，不堆积杂物遮挡气流，同时保持超净台内定期清洁，及时清理废液与残留试剂。

2. 实验操作规范：接种、传代、换液时，试剂瓶口、培养瓶瓶口需经酒精灯外焰灭菌，灭菌后避免瓶口接触非无菌表面（如桌面、手套外侧）；吸液时使用一次性移液枪头，不同试剂、不同细胞的枪头不可混用，避免交叉污染；胰酶消化细胞时，需根据细胞类型控制消化时间，观察到细胞间隙变大、贴壁松动即可终止消化，避免消化过度损伤细胞膜。

3. 环境与人员防护：操作时穿戴无菌手套、口罩、实验服，手套破损后及时更换；实验室定期通风、灭菌，避免与微生物实验区域交叉使用；细胞培养箱需定期清洁消毒，控制好温度、湿度与CO₂浓度，定期检查水箱水质，避免水箱污染引发培养环境变质。