支原体去除剂的正确打开方式与日常维护方式

支原体去除剂的正确打开方式与日常维护方式

使用过程：三步操作，四代见效  

第一步：悬浮冲洗法，去除大部分支原体  

研究表明，约98%的支原体存在于细胞表面与细胞间隙。细胞传代时，先将细胞消化下来，放入离心管中，用干净的PBS反复悬浮冲洗后低速离心，弃去上清，如此重复三次。借助支原体直径远小于细胞直径的特点，低速离心即可将细胞与支原体分离，这一步骤可冲掉约70%以上的支原体，为后续加药抑制打好基础。  

第二步：按1:100浓度加药，正常培养  

将按1:100的浓度直接加入培养基中，细胞正常培养。以500ml培养基为例，加入5ml即可；一瓶50ml规格的产品，可供5L培养基使用。培养过程中，新的支原体增殖受到抑制，旧的支原体随细胞换液逐步减少。  

第三步：连续4代培养，实现基本清除  

按照上述流程，通过约4代左右的培养，细胞中的支原体基本可被清除。整个祛除过程无需丢弃原有细胞，既保住了前期扩增与改造的工作成果，也让实验得以持续推进。使用期间需确保环境、试剂及耗材洁净，避免新的支原体污染进入体系。  

维护与储存：规范保存，避免反复冻融  

储存条件与效期，按标准执行  

支原体去除剂常规应在-18℃避光保存。使用前建议先融化并进行分装，分装后仍置于-18℃避光保存，使用时按需融化配制，避免反复冻融影响活性。配制好培养基后，混合液应在2-8℃条件下储存，且不超过4个星期。产品效期为1年6个月。  

使用细节，决定祛除效果  

每次使用前，务必先采用厂家推荐的"悬浮冲洗法"处理细胞，以达到更好的支原体祛除效果。同时，祛除支原体是一个系统工程，实验室环境、培养基、血清及耗材的洁净程度同样关键，只有前后端协同，才能确保4代培养后污染得到稳定清除。