细胞分离液的作用及实验步骤
更新时间:2019-10-17 | 点击率:1251
细胞分离液的作用及实验步骤
细胞分离液是通过运用除去血液中的纤维蛋白或抗凝血剂处理人体血液;这种改良对于其他物种来源血液或者其他组织非常有必要。
1.轻轻颠倒瓶子使LSM充分混合
2.无菌转移3mlLSM到15ml离心管中。
3.混合2ml除纤维蛋白血液或肝素处理血液和2ml生理盐水
4.仔细的将稀释血液加入3mlLSM(室温)于15ml离心管中,在血液和LSM中形成一个明显的分层。不要将稀释血液混合入LSM中。
5.室温下400g离心15-30分钟,离心可以沉淀红细胞和多核白细胞同时可以再LSM上形成一层单核淋巴细胞,如上图所示。
6.吸出淋巴细胞上方2-3mm的血浆。
7.吸取淋巴细胞层以及它下面一半的LSM和转移到另外的一个离心管。加入等体积的平衡盐缓冲液至淋巴细胞离心管中,室温离心10分钟,离心速度设定在既不损伤细胞又能沉淀细胞即刻,例如160-260xg(去除LSM和降低血小板的百分比)。
8.用平衡盐缓冲液清洗细胞,用适当的培养基重悬细胞。
以上便是今天关于细胞分离液的作用及实验步骤的全部分享了,希望对大家今后使用本设备能有帮助。