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读懂Biocoll细胞分离液主要特点及使用须知

更新时间:2021-01-22  |  点击率:941
   Biocoll细胞分离液是由德国Biochrom公司推出的新一代分离液。它除了可分离淋巴细胞外,更常用于胰岛细胞的分离。胰岛细胞的移植是一种有效的糖尿病新型疗法,可解决特别是I型糖尿病患者的胰岛细胞不足及功能低下的问题。
  特点:
  1、提供多种密度的Biocoll细胞分离液,可分离外周血,骨髓和脐带血中的单个核细胞,低密度的基质细胞,间充质干细胞以及啮齿动物的血细胞等。
  2、生产过程符合GMP以及美国药典标准,无菌即用,内毒素含量低。
  3、分离效果好,所得细胞活性>80%,Ficoll可高压灭菌,有效期长。
  应注意如下事项
  分离方法会影响胰岛的产率和存活率,因此,取材时需要注意
  1.胰脏应快速取材,保持包膜完整。
  2.建议采用UW溶液运输。
  3.对胰脏进行评估,在消化酶灌注前去除多余的脂肪和残留的十二指肠和脾脏。
  4.消化过程不宜进行震荡,以保证胰腺组织被灌注的消化酶液消化,而不是被胰腺所释放的胰蛋白酶消化。
  5.要保证胰岛的包膜完整,消化不能太充分。宁可不足,也不可过头,否则会影响胰岛纯化的产率。
  1.分别将7mL和10mL
  Biocoll细胞分离液(D=1.077g/mL,20℃)放入15mL和25mL的离心管中。
  2.将肝素化抗凝全血(50U/mL肝素,无稳定剂)与等体积培养基混合均匀,小心添加在分离液的液面上。
  3.1200g离心20min。用巴斯德吸管吸取(70-100%)淋巴细胞富集层(位于血浆和Biocoll之间),加入培养基中洗2次,*300g离心10min.*200g离心10min,即得所需淋巴细胞,可以按常规方法进行细胞计数等实验。