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关于维生素测定培养基的这些问题,您肯定也遇到过

更新时间:2021-08-11  |  点击率:952
   维生素测定培养基是利用莱士曼氏乳酸杆菌对维生素的特异性和灵敏性,定量测定出试样中维生素的含量。在测定用培养基中供给除维生素以外的所有营养成分,这样莱士曼乳杆菌生长浓度(吸光度)就会同标准曲线工作液及未知待测溶液中维生素的含量呈正比的线性关系。以不同浓度标准溶液的维生素含量为横轴,以莱士曼乳杆菌生长浓度(吸光度)为纵轴,即可绘制标准曲线,根据标准曲线即可计算出试样中维生素的含量。
  维生素测定培养基的常见问题回答:
  1.该测定培养基能用肉眼判断其pH值吗?
  答:该测定培养基中酚红的含量与普通培养基中的酚红含量不同,不能通过肉眼观察或通过经验来判定pH值,建议使用pH计进行测定。
  2.什么培养基中可以省去加酚红?
  答:酚红在培养基中用作pH值的指示剂:中性时为红色,酸性时为黄色,碱性时为紫色。酚红本身对生物制品质量并不会产生影响,可以通过纯化技术去除,但酚红在无血清培养基可能带来胞内钠/钾失衡,影响细胞生长,当然这种作用能被血清所中和或减轻。酚红并不是培养基中必需的一种成分,很多国外的疫苗或抗体生产企业在生产过程中都使用无酚红培养基。
  3.谷氨酰胺溶液和碳酸氢钠的配制方法是什么?
  答:以0.2mol/L的L-谷氨酰胺配制为例:称取L-谷氨酰胺2.92g,加注射用水100ml,充分搅拌混匀。用0.2μm滤膜正压过滤除菌。溶液应在4℃下避光保存,2周内使用。
  以7.5%NaHCO3的配制为例:称取NaHCO37.5g溶于100ml蒸馏水中过滤除菌。
  4.维生素测定培养基的缓冲系统是什么?
  答:平衡盐一般是由无机盐及葡萄糖组成的。平衡盐有Hanks′系统、Earle′s系统、Dulbecco′s磷酸缓冲盐系统等。