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支原体DNA抽提Kit的操作方法

更新时间:2022-10-25  |  点击率:565
  支原体DNA抽提Kit有如下几种情况。如细胞培养液中存在抑制PCR的物质,这时就需要提取。细胞培养基中的血清浓度如果超过12%,那么对下游的PCR反应会产生抑制。酚红,对荧光定量PCR的检测也会干扰。这些均可以通过使用Miverva公司的支原体DNA提取试剂盒来克服。对于样品类型是细胞团、疫苗、冻存细胞和石蜡包埋的组织,也需要提前提取DNA。另外,如果样品中蛋白含量高于10mg/ml,则先需要用蛋白酶K进行处理。
  支原体DNA抽提Kit与细胞培养高度重合的培养条件,注定了支原体要与细胞共同竞争有限的生存资源。
  早有研究表明,一些支原体(包括最为常见的人型支原体、发酵支原体、精氨酸支原体等),通过精氨酸脱亚胺酶分解精氨酸来供能。当这些支原体混入细胞培养体系后,会与细胞争抢精氨酸,导致细胞「吃不饱饭」,出现营养不良的症状:生长速率异常、活力下降、易脱壁等等。
  如果你培养的细胞出现以下情况,基本可以确定是支原体感染了,不放心的话可以再配合支原体检测试剂(检测神器帮你揪出培养基中的支原体!)进一步确认。
  支原体DNA抽提Kit细胞被支原体污染后的表现
  1.细胞生长缓慢
  2.细胞变形
  3.培养基中碎片增加
  4.细胞易聚团
  5.镜下观察有小黑点
  6.培养基提前变色