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2024-3-14

一、精选内毒素更低批次细胞对内毒素非常敏感，过高的内毒素可诱导细胞释放炎症因子、引导细胞衰老或凋亡。不仅如此，胎牛血清会经常或长时间作用于细胞，一旦内毒素含量过高，细胞相当于长期在“有在毒培养基”中生长，被内毒素影响，细胞将处于“亚健康状态”，进而影响实验结果的稳定与准确性。因此，为保证细胞的健康，在培养细胞时，应该选用内毒素含量尽可能低的血清，以保障实验的顺利进行。Ausbian®进口特级胎牛血清，选择内毒素含量≤3EU/ml，澳洲进口血源，曾经是细胞典藏等重大项目...

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常规细胞实验大汇总~细胞膜片钳技术细胞膜片钳技术：膜片钳技术（patchclamptechniques）是采用钳制电压或电流的方法对生物膜上离子通道的电活动进行记录的微电极技术。检测原理：用一个尖duan直径在1.5-3.0um的玻璃微电极接触细胞膜表面，通过负压吸引使电极尖duan与细胞膜之间形成千兆欧姆以上的阻抗封接，此时电极尖duan下的细胞膜小区域（膜片,patch）与其周围在电学上分隔，在此基础上固定（钳制,Clamp）电位，对此膜片上的离子通道的离子电流进行监测及记录。用途：细胞膜片钳技术是当前研... 查看详情 2022-05-05
你知道细胞培养操作过程有什么吗？注意无菌。无论哪一管液体，开盖后尽量立即关上（如果有几瓶都需要开的，也注意，可以虚盖）。盖子向上放。操作时不要从开盖的容器上方经过。另外，无菌台面上摆放的各种东西，最好是一字摆开，平行于自己。尽量不要前后重叠。细胞操作中所用的所有耗材试剂最好都是细胞培养专用。一般都以一次性耗材居多。1ML枪头为加长型专用培养枪头。移液管亦有专用10mL一次性无菌移液管（1）细胞换液：培养皿/瓶用枪头或移液管吸去原培养液，加入新培养液。（2）细胞传代：传代之前先观察，细胞是否密集，是否开始融合... 查看详情 2022-04-29
细胞培养注意事项有哪些（基础级）总的原则：无菌操作、保证细胞培养环境的稳定性按时间顺序整理1、细胞房和生物安全柜（或超净工作台）先开紫外照射30min。作用：对环境灭菌（空气）。（备注：如果着急，至少也要开15分钟）在做实验之前考虑好需要哪些物品。开始照射之前，将所需要用到的物品都放到生物安全柜（或超净工作台）里面。常用移液枪或电动移液器等，需要在工作台上放置一套专用设备。细胞培养箱一般都已经调整好。定期留意一下二氧化碳是否足够。不够及时更换。2、显微镜需要定期消毒酒精擦拭。注意：显微镜一般都放在细胞房。3... 查看详情 2022-04-29
常规细胞实验大汇总~细胞凋亡实验在很多课题中，细胞实验都是*的。除了之前我们介绍的细胞复苏、传代和冻存这“基础三件套”之外，还有许多常见的操作，需要我们了解甚至是熟练掌握。磷脂酰丝氨酸外翻分析：又叫做AnnexinV法，常用来检测细胞凋亡。检测原理：磷脂酰丝氨酸(Phosphatidylserine,PS)正常位于细胞膜的内侧，但在细胞凋亡的早期，PS可从细胞膜的内侧翻转到细胞膜的表面，暴露在细胞外环境中。Annexin-V是一种分子量为35~36KD的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白，能与PS高亲和力特异性结合... 查看详情 2022-04-28
常规细胞实验大汇总~细胞增殖实验在很多课题中，细胞实验都是*的。除了之前我们介绍的细胞复苏、传代和冻存这“基础三件套”之外，还有许多常见的操作，需要我们了解甚至是熟练掌握。今天我们就来盘点一下，那些助力高分文章发表的细胞实验技术（第一期）。细胞增殖实验MTT法：又称MTT比色法，是一种检测细胞存活和生长的方法。检测原理：活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲臜（Formazan）并沉积在细胞中，而死细胞无此功能。二甲基亚砜（DMSO）能溶解细胞中的甲臜，用酶联免疫检测仪在4... 查看详情 2022-04-28
细胞凋亡检测实验细胞膜是一选择性的生物膜，一般的生物染料如PI等不能穿过质膜。当细胞坏死时，质膜不完整，PI就进入细胞内部，它可嵌入到DNA或RNA中，使坏死细胞着色，凋亡细胞和活细胞不着色。而一些活细胞染料由于为亲脂性物质，可跨膜进入活细胞，因而可进行活细胞染色。Hoechst33342是一种活性荧光染料且毒性较弱，它是双苯并咪唑的一种衍生物。与DNA特异结合（主要结合于A-T）碱基区），显示凋亡细胞和活细胞。凡是看到有凋亡小体的细胞都是凋亡细胞。一、试剂准备1.三尖杉酯碱（HT）：300... 查看详情 2022-04-27

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