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2024-3-14

一、精选内毒素更低批次细胞对内毒素非常敏感，过高的内毒素可诱导细胞释放炎症因子、引导细胞衰老或凋亡。不仅如此，胎牛血清会经常或长时间作用于细胞，一旦内毒素含量过高，细胞相当于长期在“有在毒培养基”中生长，被内毒素影响，细胞将处于“亚健康状态”，进而影响实验结果的稳定与准确性。因此，为保证细胞的健康，在培养细胞时，应该选用内毒素含量尽可能低的血清，以保障实验的顺利进行。Ausbian®进口特级胎牛血清，选择内毒素含量≤3EU/ml，澳洲进口血源，曾经是细胞典藏等重大项目...

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细胞培养中的污染监控与检测——真菌上一篇文章中，我们说到如果在养细胞的过程中，如何判断细胞是否被细菌感染以及如何祛除细菌污染。还没看的戳戳下面的链接直达细胞培养中的污染监控与检测——细菌今天我们来讨论一下，细胞培养过程中的真菌感染。二、真菌污染真菌概述真菌是一类具真核和细胞壁的异养生物。真菌可以通过孢子延续种群，典型的营养体为丝状分支结构。可污染细胞培养基的真菌种类繁多，最常见的有曲霉菌，白色念珠菌，酵母菌，黑霉菌，孢子菌等。真菌污染症状与其他污染相比，真菌污染更容易被观察到。具体表现为：在培养基中会形成淡黄... 查看详情 2022-03-04
细胞培养注意事项~血清血清1、血清分为：a)新生牛血清（新生的小牛5天内取血）；b)小牛血清（16周内的小牛取血）；c)胎牛血清（剖腹取出胎儿制成的）。2、我们买来的血清多处于冰冻状态，灭活前放到4度冰箱，使其缓慢溶化。56度水浴45分钟灭活，灭活后冷却至室温再放回冰箱冷冻层中。灭活是灭活补体系统中具有蛋白酶活性的成分，对于一些难养的细胞，灭活补体是很重要的。但是灭活的温度也可能会破坏血清中的生长因子，所以到底该不该灭活血清，还没有一个很明确的标准，可能还是要视情况而定吧。3、血清在溶化过程中，纤... 查看详情 2022-03-04
细胞培养中的污染监控与检测——细菌细胞培养是生物医学研究的常见操作，其中避免细菌污染是重要一环。细胞是否干净，直接关系到实验结果稳定性的好坏。一般情况下细胞实验过程中出现的常见污染主要有：细菌污染、真菌污染和支原体污染。每种情况又分别有不同的症状和解决方法。我们将分三篇文章，简要概述三种不同污染的症状及处理方法。一、细菌污染细菌概述细菌是一种原核细胞微生物，一般为微米级别。细胞培养过程中常见的污染菌为大肠杆菌、葡萄球菌、假单胞菌等。细菌污染症状与其他污染相比，细菌污染在细胞培养过程中“发病”更为迅速，较容易被... 查看详情 2022-03-03
支原体污染的细胞都会出现哪些表现？细胞培养被支原体污染是个世界性问题，在细胞培养中支原体感染发生率达到63%。支原体是一类无细胞壁，形态呈高度多形性，为圆形、丝状或梨形，其直径仅有0.13～0.18μm，变形能力大，故能通过滤菌器，突出的结构特征是没有细胞壁，对作用于细胞壁生物合成的抗生素不敏感。研究表明，支原体能耗尽营养物，促进代谢积累，导致pH改变，对细胞造成多种影响，包括生长状况、生化特性、代谢、免疫、以及细胞存活等多方面的改变，继而干扰实验结果，或造成无法解释的差异。更加不幸的是拯救被感染的细胞几乎是... 查看详情 2022-03-03
细胞培养注意事项~培养基培养基1、培养基的选择依细胞种类而定。如果是从别的实验室借来的细胞，最初阶段一定要保持细胞原有的培养条件；特殊种类的细胞，比如内皮细胞，可以借鉴网上培养成功的条件，添加一些特定成分。2、液体培养基的保存条件应是冰箱4度冷藏。小六儿见过有的大实验室细胞量多，一次性购买的培养基瓶数也多，有些人可能觉得-20冰箱保存时间会更久一些。但是经过冷冻后的培养基再溶化时，你会发现培养基的颜色发生变化，颜色变深，这就是培养基的PH值升高了。3、培养基中都含有大量的谷氨酰胺，用来合成细胞生长所... 查看详情 2022-03-01
细胞培养注意事项~无菌操作无菌操作细胞培养最看重的就是无菌操作，无菌操作是细胞培养是否成功的关键点。1、使用前用75%的乙醇擦拭细胞间的桌面、超净台、孵箱和离心机等；紫外照射细胞间和超净台30分钟以上才可以进入使用。2、进入细胞间必须穿上隔离服或者细胞间专用的白大衣，戴上手套和口罩，换上拖鞋，严格意义上来说，帽子也是要带的。除了隔离服，其他穿着物品最好一次性使用。3、凡是放入超净台中的不是一次性使用的物品事先都需要经过高压灭菌；不能进行高压处理的物品也需要经过75%的乙醇消毒。包括酒精灯、吸管、移液器... 查看详情 2022-03-01

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