微生物法测定泛酸的方法步骤

泛酸是辅酶A（CoA）和酰基载体蛋白（ACP）生物合成的重要前体物质，参与人体中类固醇、褪黑激素、抗体和亚铁血红素的合成，是维持生命正常生理机能的必需小分子有机物，也是婴幼儿乳粉中重要的营养物质。

目前的两种方法——微生物法和液相色谱法都可以用于检测奶粉等婴幼儿食品中的泛酸，结果具有可比性。微生物法法测定泛酸含量灵敏度高，其标准曲线相关系数、回收率和相对标准偏差方面，检测结果都较好。而液相色谱法的检测速度较慢、成本较高，所以采用微生物法进行大量样本的测定，被美国AOAC所推荐，也是我国国家标准检验方法的仲裁法。

但该方法操作步骤较多，微生物生长的不确定性强也会影响结果。注意这些可能存在的影响因素，可以保证测量结果的稳定和准确。有人研究发现，对泛酸检验结果影响zui大的是试样前处理（存在泛酸损失）及稀释（包括容量瓶、吸量管、量筒等玻璃器具的校准和室温对液体体积的影响），其次是标准溶液的配制。另一项研究则发现，是微生物因素引起的吸光度曲线偏离线性影响zui大，因此建议在日常监测中，减少微生物培养环境因素的波动，对培养环境实时更严格的控制。

关于微生物法测泛酸的精密度，有人对14个婴儿配方奶粉的泛酸含量进行了测定，进行了28次相对误差和20次回收率的观察，发现75%的结果相对误差都<10%，回收率有80%在90~110%之间，说明该方法用于检测奶基婴幼儿食品是可行的。

又有研究发现，标准曲线在0~50ng/ml范围内，线性关系较好。同时提出几点注意事项，要注意无菌操作；避免菌种污染；玻璃器皿要严格清洗；必要的话，样本多做几个稀释度的实验；降温过程中，要将试管浸入冷水中，使其迅速降温，避免沉淀和颜色产生；用软件拟合4次泛酸标准曲线。