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『Venor®GeM qEP』助力抗肿瘤药物研发取得新进展

更新时间:2023-08-08  |  点击率:248

美国食品和药物管理局(FDA)规定,用于细胞治疗的产品,需要通过支原体检测,来保障产品在使用过程中的无菌性和安全性。

在细胞培养实验中,支原体污染的风险较高。以目前版本的各国药典中记载,28天培养法是“金标准",但对于应用于临床的生物制品来说,这种方法并不符合实际的需求。速度更快、灵敏度更高和特异性更强的NAT法,经过方法学验证,也可替代药典中的传统方法。

一项“FGFR抑制剂的临床开发"的科学研究中,研究人员使用德国MB公司的Venor®GeM qEP支原体检测试剂盒,对其使用的细胞系进行支原体风险评估。

研究背景

成纤维细胞生长因子受体(FGFR)受体酪氨酸激酶(RTK)家族包含四个成员- FGFR1, FGFR2, FGFR3, FGFR4。FGFR在细胞增殖、迁移、血管生成和存活中起着关键作用。FGF/FGFR信号通路失调可导致不同肿瘤类型的形成,包括膀胱癌、胃癌、子宫内膜癌和肺癌。因此,靶向FGFR为FGFR依赖性肿瘤患者的抗癌治疗提供了一个有吸引力的策略。

研究人员发现了了CPL304110,一种有效的、选择性的小分子,作为FGFR 1/2/3抑制剂,可以用作FGFR畸变癌症的潜在药物。

研究结果

首先,测试了对FGFR激酶的潜在抑制作用。化合物CPL304110对FGFR2、FGFR1 和FGFR3活性的抑制相对更强。在接下来的实验中,研究人员分析了CPL304110对7种激酶的选择性,这些激酶与FGFR受体(VEGFR2、PDGFRβ)具有更高的结构同源性,或在肿瘤发生和进展中发挥重要作用(AURKA、FLT3、IGF1R、JAK2、TRKA)。TRKA激酶和KDR的抑制值显著。

最后,研究人员对CPL304110进行了针对468个激酶的广泛体外筛选。

在该研究中,研究结果表明,CPL304110是一种有效的FGFR1、FGFR2、FGF3抑制剂,同时对CSF1R、FLT3(D835V)、KIT(A829P)、RET、RIPK1、TRKA、TYK2、KIT(V559D)RET(M918T)也有很强的抑制活性。额外的抑制作用可能不仅是有益的,而且还表明CPL304110是治疗具有特定突变的癌症患者的有希望的药物。

CPL304110的抗增殖活性在一组不同来源和FGFR依赖性的人肿瘤细胞系中被确定。在正常的非肿瘤细胞系HUVEC上验证了CPL304110对细胞增殖的影响,以确定其潜在的安全阈值。用CPL304110处理的细胞显示FGFR介导的信号激活显著降低。

在体内,口服CPL304110在所有被测试的异种移植模型中都具有很强的抗肿瘤功效。

相关实验

对不同癌细胞和对照细胞系进行了化合物细胞毒性评估。在研究中使用了两种类型的细胞系:

  • 与已确认的FGFR基因异常相关的FGFR依赖性细胞系

  • FGFR非依赖性细胞系。

研究人员还使用正常细胞系HUVEC作为对照。所有细胞系均按照生产厂家的说明进行培养,并通过Venor®GeM qEP 支原体检测试剂盒(Minerva Biolabs的qPCR产品)进行了支原体检测,并确认为阴性。