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『Ausbian进口特级胎牛血清』助力组蛋白与DNA复制过程新发现

更新时间:2023-08-08  |  点击率:228

在细胞更新过程中,表观遗传信息需要精确地恢复,以维持DNA复制后的细胞身份和基因组完整性。组蛋白标记H3K27me3对胚胎干细胞兼性异染色质的形成和发育基因的抑制至关重要。

然而,H3K27me3是如何在DNA复制后精确地恢复的,仍然知之甚少。近日,科研人员使用ChOR-seq(复制后染色质占用)来监测DNA复制过程中H3K27me3在新生DNA上的动态重建。研究人员发现H3K27me3的恢复速率与致密染色质状态高度相关。

此外,科研人员还发现连接蛋白H1促进H3K27me3在抑制基因上的复制后快速恢复,并且在H1部分耗尽后,H3K27me3在新生DNA上的恢复速率大大降低。

最后,体外生化实验表明,H1通过压实染色质促进PRC2对H3K27me3的增殖。

总之,研究结果表明,h1介导的染色质压实有助于DNA复制后H3K27me3的繁殖和恢复。

相关研究:

“Histone H1 facilitates restoration of H3K27me3 during DNA replication by chromatin compaction"

该项研究中,为了构建含有mESCs的8×TetO,研究人员直接将8×tetO阵列与驱动EGFP基因表达的人类CYP26A1启动子融合。

CRISPR/Cas9的引导序列为:5’-TCTGAACTGGCTGTTTAGTC-3’。为了研究组蛋白h1介导的染色质压缩在促进H3K27me3增殖中的作用,研究人员分别在野生型或H1c/d/e-TKO靶向mESCs中过表达HA-EZH2-TetR和FLAG-EED或HA-EED-TetR和FLAG-EZH2。

所有mESCs在明胶包被的组织培养板上生长,mLIF浓度为1000 U/ml ,培养基中添加15% FBS (Ausbian,澳洲)、100 mM非必需氨基酸、0.1 mM β-巯基乙醇、2 mM l -谷氨酰胺、核苷和抗生素。

该项研究所用到的血清是Ausbian进口特级胎牛血清。

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