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盘点脱脂胎牛血清的几种常见制备方法

更新时间:2023-09-12  |  点击率:332

脱脂胎牛血清与常规胎牛血清相比,包括去除内源性脂类、磷脂、甘油三酯、脂肪酸、游离脂肪酸和胆固醇等成分在内的脂类物质含量更低,适合一些对脂类敏感的细胞系、脂质代谢研究或动脉硬化研究。。

 

脱脂胎牛血清的处理方法有很多,常见的主要有以下几种:

 

1、离心法:该方法是应用比较广泛的方法之一。先将胎牛血清放入离心管中,然后进行高速离心。在高速离心的作用下,脂质会聚集在血清样品的表面形成一层脂肪沉淀,然后可以通过小心地将上清液(脱脂后的液体部分)分离出来,从而减少脂质含量。

2、超滤法:超滤是另一种脱脂的方法,通过使用特殊的过滤器来分离脂质。这些过滤器的孔径足够小,可以阻止脂质通过,但允许其他组分通过。通过使用不同孔径的过滤器,可以控制去除的脂质量。

3、溶剂提取法:溶剂提取法使用有机溶剂,如氯仿或甲醇,来提取脱脂胎牛血清中的脂质。这个过程中,脂质会溶解到有机溶剂中,然后可以通过蒸发溶剂来去除脂质。

4、膜过滤法:膜过滤法(例如3 x 100 nm滤膜过滤)使用特殊的脱脂膜来分离脂质。这些膜通常是亲水性的,可以阻止脂质通过,但允许其他成分通过。脱脂胎牛血清通过这些膜时,脂质会被滤除。

5、凝胶过滤法:凝胶过滤法使用凝胶柱将脱脂胎牛血清通过,脂质会被凝胶吸附。然后,纯净的血清可以从凝胶柱中洗出。

6、其他方法,也有一些研究表明通过在FBS中加入气相二氧化硅(Sigma, S5130, 20 g/L),混合过夜,离心,无菌过滤,也可以得到去脂胎牛血清。

 

Ausbian澳洲进口特级胎牛血清在细胞培养中的作用:

1.提供对维持细胞指数生长的激素,基础培养基中没有或量很少的营养物,以及主要的低分子营养物。

2.提供结合蛋白,能识别维生素、脂类、金属和其他激素等,能结合或调节它们所结合的物质活力。

3.有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合,起到解毒作用。

4.是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。

5.起酸碱度缓冲液作用。

6.提供蛋白酶抑制剂,使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活,保护细胞不受伤害。

7.参与细胞冻存。

在细胞培养中,胎牛血清加入基础培养基的浓度大多为5%20%(最常见为10%)的。具体到不同试验,应依据文献报导,或细胞类型或基础培养基的成分来确定适宜浓度。胎牛血清应在-20℃储存,运输应干冰冷链运输,避免反复冻融,确保血清中因子活性不受影响,保证血清优良品质。