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CRISPR系统的实际应用,PCR Clean™助力科研

更新时间:2023-09-23  |  点击率:313

CRISPR是一种常见的基因编辑技术。此类操作对实验室中,核酸污染的控制有比较高的要求。德国MB公司生产的PCR Clean™,即用型核酸污染祛除喷雾,可直接喷洒在待清洁物品表面,风干即可,便捷高效地清除DNARNA, 以及DNA酶、RNA酶等核酸污染。

 

CRISPR系统在生物学相关的许多领域,都有应用。近日,发表在《Nature》上,标题为:“CD300ld on neutrophils is required for tumour-driven immune suppression"的文章,在肿瘤小鼠模型中进行了体内CRISPR-Cas9筛选,并确定CD300ld是肿瘤有利受体的关键候选。

 

免疫检查点阻断在肿瘤治疗中取得了相当大的成功。然而,很大一部分患者对这些治疗只有很小的反应,甚至没有反应。以骨髓细胞含量高为特征的免疫抑制肿瘤微环境(TME)是有效免疫治疗的主要障碍。

 

中性粒细胞是一种数量丰富且种类繁多的髓样细胞,提供先天防御急性感染或炎症。在癌症和其他病理性慢性炎症的情况下,异常的粒细胞生成显著增加骨髓中中性粒细胞的释放。这些中性粒细胞在功能上受到干扰,特别是在晚期癌症中,表现出高度的可塑性,并促进了肿瘤发生的直接和间接机制。这种病理活化的中性粒细胞表现出强大的免疫抑制活性,在功能上被命名为PMN-MDSCs或粒细胞髓源性抑制细胞(g-MDSCs),在小鼠和人类肿瘤发生中成为TME的关键组成部分。

 

多种中性粒细胞发育状态在肿瘤中共存。PMN-MDSCs和经典中性粒细胞具有相同的髓系起源和表面标记,然而,它们在功能上是不同的,并且很少有原型遗传和表型标记来区分它们。在肿瘤环境中,大多数中性粒细胞被证明是具有免疫抑制活性的PMN-MDSCsPMN-MDSCs在大多数类型的癌症中扩增,促进肿瘤进展并导致对免疫治疗的不良反应。需要鉴定参与PMN-MDSCs募集和功能的关键分子,以选择性地靶向PMN-MDSCs进行肿瘤治疗。

 

在这项研究中,科研人员通过表征细胞表面蛋白,确定CD300ldPMN-MDSCs中存在的关键免疫抑制因子,为癌症免疫治疗提供了克服TME免疫抑制的潜在靶点。

 

总结:

科研人员通过在肿瘤小鼠模型中进行了体内CRISPR-Cas9筛选,确定CD300ld是肿瘤有利受体的候选。CD300ld在正常中性粒细胞中特异性表达,在PMN-MDSCs中发生肿瘤后表达上调。CD300ld敲除以pmn - mdsc依赖的方式抑制多种肿瘤类型的发展。CD300ldPMN-MDSCs募集进入肿瘤及其抑制T细胞激活功能所必需的。CD300ld通过STAT3-S100A8/A9轴起作用,敲除CD300ld逆转肿瘤免疫抑制微环境。CD300ld在人类癌症中表达上调,并与患者生存表现出不利的相关性。阻断CD300ld活性可抑制肿瘤发展,并与抗pd1具有协同作用。我们的研究发现CD300ldPMN-MDSCs中一个关键的免疫抑制因子,是肿瘤免疫抵抗所必需的,并为癌症免疫治疗提供了一个潜在的靶点。