提高细胞培养效率的两个关键点

细胞体外培养技术的应用，是人类开启生命奥秘大门的钥匙。该项技术的发展，科学家们能够脱离供体的情况下，在实验室中，研究并分析各种细胞的生命活动。高效的细胞培养来之不易，操作过程的实际情况十分复杂，存在诸多可能会影响培养效率的因素，包括实验环境、实验材料的选择等。

一、实验环境

细胞培养环境需要严格无菌，甚至是空气都要使用新风系统进行过滤。对于墙壁、地板、桌面、超净工作台，更是要定期清洁。德国Minerva Biolabs公司的Mycoplasma-off™ Wipes和Mycoplasma-off™直接用于实验环境、物品、仪器、设备的清洁。该试剂无需稀释，喷洒或擦拭后自然风干，即可高效清除环境中的微生物污染。

细胞培养环境中，培养箱水槽，水浴锅经常会有支原体以及各种细菌、霉菌滋生，稍有不慎或清洗不及时，水槽中的水源即会成为细胞污染的重要来源。保持水槽的洁净，对细胞培养的顺利进行非常重要。推荐：全球众多实验室日常都在使用德国MB公司生产的Water Shield™支原体污染防护剂（水槽用）。Water Shield™可持续作用四周，使水源避免受到支原体、细菌、真菌、霉菌、孢子的污染。按1:200的比例，加到水浴锅或培养箱水盘的无菌水中即可

二、实验材料的选择

所培养的细胞，来源应清晰，确保无污染。对于培养试剂及耗材，也尽可能选择无菌的。

细胞离不开高品质血清。而胎牛血清作为天然的培养基，在培养实验中占有重要位置。选择胎牛血清的重要指标之一，就是考察内毒素的含量。

内毒素在细胞传代增殖过程中，会直接参与细胞凋亡的过程，一定剂量下，会给细胞培养带来很多问题，特别是免疫细胞和干细胞，例如：诱导免疫细胞释放炎症因子，抑制小鼠红细胞集落的形成等。因此，血清中内毒素含量越低，对细胞毒性越小，越利于细胞的生长和传代；反之，内毒素含量过高，会直接导致细胞状态不良，提前老化，甚至死亡。

基于以上研究，用于细胞培养的牛血清，要通过严格的内毒素水平检测，每一批血清都有完整的检测报告，通过内毒素的检测数值，对血清的品质进行分级和评估。

目前国际通用的分级方法，均以内毒素含量的高低来确定，内毒素含量越低，血清的级别就越高，以胎牛血清为例：

当血清中内毒素含量≤10EU/ml时，此血清为特级胎牛血清；

当血清中内毒素含量﹥10EU/ml，≤ 25EU/ml时，此血清为优级胎牛血清；

当血清中内毒素含量≥25EU/ml时，此血清为标准级胎牛血清；

Ausbian®进口特级胎牛血清，澳洲血源，均经过严格筛选， 目前所有批次内毒素都低于3EU/ml，其中有的批次可以低至≤1EU/ml。更低的内毒素血清，更利于细胞的生长和传代。