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细胞细菌污染症状及处理方法

更新时间:2023-10-02  |  点击率:289

细菌污染是生物实验室,在培养细胞的过程,常见的问题之一,会直接引起细胞死亡,影响实验进度。本期内容,我们汇总了细菌污染的症状,并分别给出了应对方法。

细菌是一种原核细胞微生物,一般为微米级别。细胞培养过程中常见的污染菌为大肠杆菌、葡萄球菌、假单胞菌等。

细胞发生细菌污染后,有哪些症状?与其他污染相比,细菌污染在细胞培养过程中“发病"更为迅速,较容易被发现。具体表现为:
细胞培养液短期内变黄且浑浊(大量酸性物质累积);
静置的培养液时不浑浊,但稍加震荡,就有许多浑浊物漂起;
可见培养液中有大量圆球状颗粒物漂浮;
细胞停止生长并有中毒表现,后出现大量死亡;

如何用实验来验证,细胞是否被细菌污染?常见的染色法、培养法以及PCR方法都可以对细菌污染进行检测。
如果只需要初步判定细胞是否被污染,课选择涂片染色或培养法对样品进行检测。
例如:革兰氏染色法会使阳性菌呈现紫色,阴性菌呈现红色;向肉汤培养基内滴入少量培养液,37 ℃培养,培养基变浑浊;专业的PCR检测:以Minerva Biolabs公司的细菌PCR检测试剂盒(Onar® Bacteria Detection Kit,货号:12-1025)为例:
该试剂盒采用PCR方法,用于检测生物样品(包括细胞培养物和病毒贮存液)中是否存在细菌。根据序列分析,该试剂盒可检测超过45种细菌属,其中含污染细胞的常见菌属:


如果细胞不幸遭遇到了细菌污染的侵袭,该如何应对呢?对于常规细胞培养物而言,发生细菌污染,建议直接将培养物丢弃,并对环境进行消杀,紫外线灭菌、消毒液擦拭培养箱、工作台等。
对于重要且污染相对较轻的细胞:一般用抗生素的常用量的 5-10 倍作冲击疗法,用药 24-48 小时后再换常规培养液,但需要需要注意的是:一旦发生污染后再使用抗生素常常难以清除干净,有的抗生素只有抑菌作用而无杀菌效应。且有研究表明,大量使用抗生素,或对细胞基因组产生影响,该种处理方法属于“杀敌一千,自损八百",因此不做推荐。

因此,防范大于治疗,在细胞实验过程中,我们不希望看到任何微生物污染的情况发生。为了避免浪费有限的精力和经费,应优先预防污染的发生。实验前穿戴好防护用具,既是保护自己,也是保护实验材料;定期对实验环境进行清洁消毒,也能有效预防微生物污染的发生。

使用专业的支原体祛除试剂,更加高效、安全和便捷。实验空间中的墙壁、实验台、桌椅板凳、显微镜、冰箱、离心机等设备和仪器,可使用Mycoplasma-off™或Mycoplasma-off™ Wipes对其进行喷涂或擦拭,清除表面的多种微生物污染。对于水浴锅、培养箱水槽等环境,可以选择Water Shield™对其进行处理。讲产品按比例直接加入水浴锅或培养箱水槽中,可预防微生物污染。