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如何通过实验判断血清是否符合实验需求?贴壁效应可供参考

更新时间:2023-10-14  |  点击率:241

是细胞培养中重要的天然培养基,含有丰富的细胞生长必须的营养成份,常用于动物细胞的体外培养。实验中较为常用的是牛血清。根据血液来源的不同,牛血清可分为:胎牛血清,新生牛血清,小牛血清,成牛血清等。

【胎牛血清】(Foetal Bovine Serum,简称FBS):是采自5-8个月胎龄牛胚胎中的胎血。此时胎牛各脏器正处生长分化阶段,血中含有丰富的生长发育因子,非常适合各种细胞的培养,一旦胚胎发育结束这些因子自动消失。因此8个月胎龄以上的牛胚胎,已接近足月,不能作为胎牛血清的原料来使用。

【新生牛血清】(Newborn Calf Serum,简称NBCS):0—7天内(也有说法是0—30天内);

【小牛血清】(Calf Serum):采自出生30——1年的小牛。

【成牛血清】(Adult Bovine Serum,简称ABS):采自成年牛收全血后分离得到血清。

血清在细胞培养过程中的作用,可大致归为以下几点:

1.提供对维持细胞指数生长的激素,基础培养基中没有或量很少的营养物,以及主要的低分子营养物。

2.提供结合蛋白,能识别维生素、脂类、金属和其他激素等,能结合或调节它们所结合的物质活力。

3.有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合,起到解毒作用。

4.是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。

5.起酸碱度缓冲液作用。

6.提供蛋白酶抑制剂,使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活,保护细胞不受伤害。

7.参与细胞冻存。

 

是许多重组蛋白及药物生产和研发用细胞培养基中的关键成分,对细胞生长的需要仍难以大规模的用其它物质所代替。研究表明,细胞通过其粘附蛋白包括纤维连接蛋白(Fibronectin,Fn)和体外连接蛋白(Vitronectin,Vn)吸附在人工材料的培养皿上。不同比例的白蛋白和胎牛血清混合溶液等复杂介质对FnVn通过培养皿表面自组装单分子膜对细胞粘附的作用有较大差异。不同胎牛血清的细胞粘附相关因子之间的差异所致,胎牛血清的细胞粘附效应可能是影响贴壁细胞生长、分化、繁殖及凋亡等生命活动的关键因素。

 

因此实验室中,可以通过对比添加不同血清的的培养液,对于细胞贴壁的促进作用,来初步判断血清是否符合实验需要。在实验过程中,可以用贴壁的细胞密度,作为评判标准。