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新手小白的细胞培养指南

更新时间:2023-10-17  |  点击率:283

细胞培养是生物科研和医学领域中至关重要的实验技术之一,它使科研人员能够研究和了解细胞的生物学特性,从而为疾病研究、药物开发和组织工程等领域提供支持。然而,对于初学者来说,细胞培养可能会显得复杂和有挑战性。那么新手培养细胞有哪些需要注意的呢?以下几个关键点可供参考。

 

1、准备工作

在开始细胞培养之前,需要先构思好实验思路,做好实验计划,准备好实验室基础设施和必要的材料。这包括培养箱、无菌操作台、培养皿、各种培养液、培养皿盖、吸管、离心机、显微镜等。确保所有设备和材料都经过无菌处理。

 

2、选择细胞系

根据不同的研究目的,选择合适的细胞系。每种细胞系都有其特定的培养要求,包括培养基、培养条件和传代方法。可从细胞来源处寻找到合适的细胞培养条件,如,细胞如果是从ATCC处购买,则可去ATCC网站寻找相关信息。

 

3、无菌操作

无菌操作是细胞培养的基本原则。在正式实验前,需要用专用消毒剂,对细胞培养房进行充分的消杀,以德国MB公司生产的支原体清除试剂:Mycoplasma-off为例,可将其喷洒在待清洁物品表面,作用1分钟后自然风干,可高效清除细菌、真菌、支原体等污染。同时,也需要定期对培养空间进行消毒。在进行任何操作之前,需在无菌操作台上穿戴实验室外套、手套和口罩,以避免细菌、真菌和病毒的污染。工作台表面和所有实验器材也必须经过严格的无菌处理。

 

4、培养基制备

根据细胞系的需求,制备适当的培养基。培养基中包含有营养物质、生长因子和抗生素,以维持细胞的生长和健康。确保培养基的pH值和温度适宜。选择一款高品质的血清也十分重要。Ausbian进口胎牛血清,内毒素含量低,澳洲血源,品质稳定。

 

5、细胞实验操作

细胞培养是一个连续的过程,从复苏开始,通常需要定期传代细胞以防止它们过度增殖,并在适当时机进行冻存。传代细胞时,将细胞分离并种植到新的培养皿中。传代的频率取决于细胞系和实验需求。

 

6、维护细胞健康

细胞的健康与培养条件密切相关。监测培养皿中的细胞密度,确保它们不过于拥挤,以免影响生长。定期更换培养基,以确保细胞获得足够的养分。

 

7、记录实验数据

在细胞培养实验中,详细的实验记录非常重要。记录培养的细胞数量、传代次数、细胞状态和任何观察结果。这将有助于实验追踪和分析。