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逆转录病毒研究取得新研究,德国MB助力科研

更新时间:2024-01-31  |  点击率:128

逆转录病毒的研究,除了细胞学研究,还需要大量的分子生物学研究,因此,对于实验室的卫生要救也更高。德国MB公司生产的PCR Clean

 

为了顺利感染宿主细胞,逆转录病毒必须将其逆转录RNA基因组的DNA拷贝整合到宿主染色体中。因此,核膜(NE)是防止逆转录病毒感染的屏障。大多数逆转录病毒依靠有丝分裂NE分解进入细胞核,因此只感染增殖细胞。然而,慢病毒,如HIV-1,是例外的,因为它们感染具有完整NEs的非分裂细胞。在该过程中,通过核孔复合物(npc)是很重要的的步骤。

 

NPCs的质量约为100 MDa,并为核细胞质运输提供通道由通透性屏障控制。核转运受体(NTRs)能够主动转运,以便利的方式穿过NPCs,并在细胞核和细胞质之间循环。进口蛋白β超家族的成员代表了最大的NTR类。它们从rangtp系统中获取能量,以rangtp控制的方式捆绑货物,并将它们转移到NPC的屏障上。NPC由大约30种不同的核孔蛋白(Nups)构建,包括大约10种所谓的FG-Nups,它们将屏障形成的苯丙氨酸-甘氨酸(FG)重复结构域锚定在NPC支架上。

 

FG结构域具有较低的序列复杂性,本质上是无序的,并且包含许多FG二肽基序,这些基序在易位过程中与NTRs结合。Nup98FG结构域及其同源性的特殊之处在于它们出现在非常高的拷贝数中,并且在每个NPC中贡献了最多的FG质量。它们具有最高的FG基序计数(50)和密度(约每12个残基中有一个)。水是这些FG结构域的不良溶剂;因此,它们很容易从稀水溶液中相分离,形成蛋白质密度很高(400mg ml1)FG相。由此产生的内聚FG相非常好地再现了核转运选择性,排除了惰性分子,如GFPmCherry,同时允许具有非常高分配系数的NTR及其货物复合物进入。此外,流动物种在黏合FG相中的分配系数是其NPC通过率的一个很好的预测指标,这两个参数在四个数量级范围内具有良好的相关性。因此,这种体外重建的FG相为研究NPC屏障的性质及其与NTRs的相互作用提供了方便的方法。

 

HIV-1感染需要病毒基因组的核进入。先前的证据表明,这种进入通过核孔复合物(NPC)进行,120 × 60 nm的衣壳通过约60 nm宽的中央通道挤压1并穿过NPC的渗透性屏障。这种屏障可以被描述为FG相,它由粘合相互作用的苯丙氨酸-甘氨酸(FG)重复体组装而成,并选择性地渗透到核转运受体(NTRs)捕获的货物中。

 

近日,科研人员发现HIV-1衣壳组装可以以一种与ntr无关的方式有效地靶向npc,并直接结合几种类型的FG重复序列,包括屏障形成的内聚重复序列。像NTRs一样,衣壳很容易分裂成体外组装的内聚FG相,可以作为NPC模拟物,不包括更小的惰性探针,如mCherry。事实上,衣壳组装极大地增强了衣壳蛋白进入FG相的能力,这也允许被封装的客户端进入。因此,数据表明HIV-1衣壳的行为类似于NTR,其内部充当货物集装箱。由于用反式NTRs涂覆衣壳会使直径增加10纳米或更多,科研人员认为这种自易位"衣壳破坏了NPC支架施加的尺寸限制,从而绕过了病毒感染的有效屏障。