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肌苷诱导CAR-T细胞的干性特征并增强效力,德国MB助力科研

更新时间:2024-01-31  |  点击率:236

细胞治疗项目需要进行支原体检测,并且根据药典要求,通过方法学验证,德国MB支原体qPCR检测试剂盒,通过欧洲药典和日本药典的方法学验证

 

腺苷(Ado)是一种免疫抑制核苷,有助于肿瘤微环境(TME)的免疫逃避。CD39(ATP二磷酸水解酶-1,ENTPD-1)CD73(5′-外核苷酸酶,NT5E)ATP代谢为Ado, Ado主要通过A2aR信号介导免疫抑制小鼠CD4+ treg共表达CD39CD73,部分通过产生ado介导免疫抑制。在人类中,大多数treg表达CD39,而CD73的表达可由缺氧诱导因子1- α (HIF1a)诱导。在TME中,肿瘤反应性T细胞富集于CD39+亚群。尽管一些研究将改善预后与更高数量的CD39+肿瘤浸润淋巴细胞相关联,但功能研究表明,CD39标志着功能失调、耗竭的T细胞。

 

嵌合抗原受体(CARs)将细胞外抗原结合域连接到细胞内信号域,从而实现mhc不依赖的抗原特异性T细胞反应CAR-T细胞对难治性B细胞恶性肿瘤非常有效,但对实体瘤的作用较弱,耗尽是限制CAR-T细胞效力的主要因素。

 

在这里,探讨了CD39的生物学特性和Ado在耗尽的人类T细胞功能障碍中的作用,并试图通过工程腺苷抵抗来增强CAR-T细胞的效力。通过体外人类CAR-T细胞衰竭模型,我们观察到耗尽的CD8+CD39+ T细胞共表达CD73,产生Ado,并通过A2aR介导Ado相关的抑制。为了诱导Ado抗性,科研人员敲除了CD39CD73A2aR,但只观察到适度的表型和转录变化。相反,将Ado代谢为肌苷(INO)的膜系链腺苷脱氨酶(ADA)的过表达显著改变了CAR-T细胞的干细胞转录组,增强了CAR-T细胞的适应性。同样,CAR-T细胞暴露于INO诱导了干细胞相关基因表达程序并增强了CAR-T细胞的功能。

 

单细胞分析显示,INO重编程代谢组,减少糖酵解,但增加谷氨酰胺解,多胺合成和氧化磷酸化。这些影响与向茎秆方向的表观遗传重编程有关。临床规模生产使用ino补充培养基产生的CAR-T细胞产品符合临床剂量标准,在动物模型中显示出增强的效力。这些数据确定了INOCAR-T细胞干细胞的诱导剂,并提供了营养调节可以驱动调节T细胞分化和增强T细胞适应性的表观遗传变化的证据。