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合成人工染色体的研究新进展,Lab Clean助力分子生物学研究

更新时间:2024-03-28  |  点击率:177

污染的DNARNADNA酶、RNA酶对于采用高灵敏PCR技术的实验室来说,并非小问题。最初来自气溶胶的DNARNA片段,可导致样品间的交叉污染,造成结果不准确和假阳性。然而,来自样品、PCR管、吸头、移液器和设备的DNARNA没有得到重视,直到在PCR中发现污染。因此,有必要采用有效的Lab Clean™,对实验室设备、任何表面和地面进行清洁,以避免污染扩散,以获得可靠的实验结果。

 

长期以来,细菌和酵母中的人工染色体一直是合成生物学家用来编写和重写基因组的载体。哺乳动物系统受限于有限的染色体工具。在人类人工染色体(HACs)被开发出来的四分之一个世纪之后,科研人员开发了一种不受控制的多聚化的解决方案,这种解决方案伴随着先前的版本。它们的HAC约为750千碱基,比以前的HAC大得多,足以容纳通过细胞分裂遗传所需的着丝粒上的多域染色质。随着细胞传递方法的简化,这些发展为推进哺乳动物和许多其他真核生物的染色体工程提供了手段。

 

相关研究发表在《Nature》上,文章标题为:“Efficient formation of single-copy human artificial chromosomes"。

 

大型DNA组装方法是合成原核生物和芽殖酵母染色体的里程碑式成就的基础。出芽酵母通过约125碱基对DNA序列定义的着丝粒控制染色体遗传,而哺乳动物和许多其他真核生物则使用较大的表观遗传着丝粒。利用着丝粒表观遗传学允许人类人工染色体(HAC)的形成,但不足以避免初始DNA分子在引入细胞后猖獗的多聚化。我们描述了一种有效地形成单副本HACs的方法。它采用了一个约750千碱基的结构,这个结构足够大,可以容纳存在于内部和外部着丝粒上的不同染色质类型,从而避免了多聚化的需要。通过使用酵母球质体融合,使哺乳动物细胞的递送流线型。这些进展允许在后生动物细胞的背景下进行忠实的染色体工程。