胎牛血清正确解冻方法步骤详解

在解冻胎牛血清之前，需要做好准备工作。首先，应确保实验室环境清洁，避免污染，可以使用紫外线照射无菌工作台和实验空间，同时配合使用实验室微生物污染祛除类试剂，比如德国Minerva Biolabs生产的Mycoplasma Off支原体祛除喷雾剂，对实验室进行清洁，降低胎牛血清在解冻、分装或使用过程中被污染的可能性。其次，准备好所需的实验器材，如无菌移液管、无菌试管，并确保这些器材是严格无菌的。此外，还需检查胎牛血清的包装是否完好无损，如有破损或污染，则不应使用。

胎牛血清这种混合物中，融化速度：蛋白质等干物质>水这类溶剂，所以蛋白质会先溶解析出，而水还是结成冰的状态，导致瓶子中间会出现一根透明的冰柱，而周围则会呈现上黄下红的分层浑浊液的状态，在使用过程中很容易引起沉淀、混合不均匀、局部浓度过高等问题，影响细胞生长。

更重要的一点是，血清中珍贵的生长因子等活性物质，它们在解冻过程中，有着与细胞复苏类似的经历，都需要快速解冻才能很大程度地保留生物活性。显然，4℃过夜这样的长时间处理，很有可能会导致一部分「营养成分」的损失，影响细胞生长。因此，正确的解冻方法，应该是尽可能让胎牛血清所有成分同时融化。

我们推荐使用更科学“三步法"对胎牛血清进行解冻。根据待解冻的胎牛血清的量不同，按照下表中的建议时长与温度对其进行处理。需要注意的是，如果血清是储存在-80℃冰箱中，正式解冻前应先转移至-20℃冰箱中过渡。