在培养基开发过程中,除去培养基中的支原体是至关重要的,以确保细胞培养的健康和实验结果的准确性。以下是一些常用的方法来清除培养基中的支原体:
抗生素治疗:
使用抗生素是清除支原体的一种有效方法。常用的抗生素包括泰乐菌素、林可霉素、壮观霉素、喹诺酮和四环素等。
德国MB Zell Shield®细胞支原体祛除试剂是一种即用型的复合抗生素,可用于保护细胞培养体系免受支原体等污染物的干扰。
在使用抗生素时,需要根据支原体类型和药物敏感性选择合适的药物,并按照药物说明书进行操作。
热处理:
将细胞培养基加热至60℃以上可以有效地杀死支原体。然而,这种方法也会杀死细胞,因此只能在实验结束后或不需要保持细胞活性的情况下使用。
过滤:
使用过滤器可以将细胞培养基中的支原体过滤掉。但这种方法可能无法清除支原体,且对于小分子的支原体可能效果不佳。
更换培养基:
一旦发现支原体污染,应立即更换新的细胞培养基,以避免支原体繁殖并扩散到整个培养体系中。
细胞株更换:
如果细胞株本身存在支原体污染,应立即更换新的、未受污染的细胞株。
纯化清洗:
对于珍贵的细胞,可以通过纯化清洗的方法去除支原体。这通常涉及使用PBS或培养基洗涤细胞数次,并通过离心力分离细胞和支原体。
预防措施:
在培养基开发和细胞培养过程中,采取预防措施是防止支原体污染的关键。这包括定期对实验室环境进行消毒、对实验操作人员进行培训、以及定期对培养箱和其他实验设备进行维护和检查。
综上所述,清除培养基中的支原体需要综合使用多种方法,并根据具体情况选择合适的方法。同时,预防措施的采取也是至关重要的,以减少支原体污染的风险。