干细胞培养基是专门设计用于体外培养干细胞的营养基质,通过提供适宜的环境和关键成分,维持干细胞的自我更新能力、未分化状态及多向分化潜能。
干细胞培养基的操作要点:
培养基配制
解冻与混合:无血清营养添加物需室温或2-8℃解冻,避免反复冻融;按比例加入基础培养基后混合均匀。
储存条件:配制后的培养基2-8℃避光保存,稳定期通常为2-3周。
细胞培养操作
基质胶包被:贴壁培养需用基质胶预处理培养板,促进细胞粘附。
细胞接种与观察:接种后置于37℃、5% CO₂培养箱,定期观察细胞形态及密度。
换液与传代:每24小时换液一次,避免活性成分耗尽;传代时控制消化时间,防止细胞损伤。
质量控制
无菌检测:每批培养基需通过细菌、真菌、支原体、内毒素检测。
性能验证:通过干细胞生长曲线实验,确认培养基能维持和扩增未分化干细胞。