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2024-3-14

一、精选内毒素更低批次细胞对内毒素非常敏感，过高的内毒素可诱导细胞释放炎症因子、引导细胞衰老或凋亡。不仅如此，胎牛血清会经常或长时间作用于细胞，一旦内毒素含量过高，细胞相当于长期在“有在毒培养基”中生长，被内毒素影响，细胞将处于“亚健康状态”，进而影响实验结果的稳定与准确性。因此，为保证细胞的健康，在培养细胞时，应该选用内毒素含量尽可能低的血清，以保障实验的顺利进行。Ausbian®进口特级胎牛血清，选择内毒素含量≤3EU/ml，澳洲进口血源，曾经是细胞典藏等重大项目...

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细胞培养操作时，如何预防支原体的污染？细胞间发生支原体污染的风险较高，因为人、试剂、细胞株都可携带支原体。下面，笔者从预防的角度，对降低支原体污染风险提供一些建议，供参考。1.预防人源携带的支原体1）应带帽子、口罩、手套、白大褂，应预防个人携带的支原体飘散到空气中，同时应注意个人卫生。2）在超净台上操作，必要时打开酒精灯。3）操作时尽量不说话。2.预防环境中的支原体可使用德国MB公司的支原体祛除喷雾MycoplasmaOff™或湿巾MycoplasmaOff™Wipe。该祛除剂中含有杀灭支... 查看详情 2020-11-24
如何应对培养细胞的老化？细胞老化是有时能遇到的现象，尤其是干细胞。它有一些表现，如：细胞胞浆内特别是在核区附近出现黑色颗粒细胞胞浆内出现空泡细胞立体感逐渐消失，部分细胞呈扁平状细胞增殖速度下降细胞贴壁能力减弱等等细胞是否老化或衰老，还可以用细胞衰老检测试剂盒来染色，该染色主要针对细胞的β半乳糖苷酶，这是一种特异性酶，如果染色阳性，表明细胞正处于老化过程。如果预防细胞老化？下面笔者提出几条建议，供参考。1.不要等细胞长得太满才传代。细胞太密会导致细胞状态下降，产生细胞接触性抑制。2.细胞不要消化过度。... 查看详情 2020-11-24
支原体污染给制药业和科研带来了哪些挑战？支原体是真正的细菌，但它们没有细胞壁，因此与“经典”细菌相比，它们的多形性更高。由于支原体在细胞形态上具有可塑性，并且细胞尺寸较小，因此甚至可通过0.1μm的滤器。这也是为什么它们作为细胞培养衍生的生物制剂的潜在污染物而受到关注的原因之一，尤其是当生物反应器为支原体生长提供有利条件时。支原体在人、动物、植物和昆虫中普遍存在，因此，在生物制药过程中使用的任何动植物来源原料都可能含有支原体。另一方面，某些支原体通过生物膜可以在环境中长期生存。支原体检查是生物制药生产过程中质量控制... 查看详情 2020-11-23
人骨髓间充质干细胞的培养人软骨损伤后，可用软骨组织工程进行软骨缺损修复。软骨可由间充质干细胞分化而来。因而，间充质干细胞的培养和分化具有重要作用。间充质干细胞（MSC）可以2×10的5次方／cm2的密度接种于特定的培养液(低糖DMEM，含15％FBS，100u/L氨卡青霉素，100mg／L链霉素，250mg／L两性霉素)中，置于37℃、5％CO2和饱和湿度的孵箱内培养。3天后更换培养液，小心弃去未贴壁细胞。以后每3天换液一次。MSC体外扩增时，是待细胞长至铺满瓶底80％时，用0.1％胰蛋白酶和0.0... 查看详情 2020-11-20
论动物细胞的灌注培养动物细胞的培养技术自上世纪初出现以来，经历了一个多世纪的发展，获得了很大的进步。不仅建立了许多细胞系和培养了许多类型的原代细胞，而且开发了人工合成培养基和无血清培养基，并且出现了细胞工程，哺乳动物细胞的大规模培养获得了工业化的应用，用于生产重组蛋白、单克隆抗体等生物药、载体病毒、病毒性疫苗等。开发了微载体、中空纤维管和生物反应器等，并且实现了一种不同以往的培养方式——灌注培养。目前，灌注培养已成为高产率培养细胞的主要方法。灌注培养有四个特点：一是能及时地补充营养物质和排出代谢... 查看详情 2020-11-20
支原体对细胞的不良影响，你应该早知道近日《动物医学进展》上有一篇文章《支原体对细胞培养污染的研究概况》（动物医学进展，2013,34：112-117）谈到“支原体污染细胞的严重性”，里面提到：支原体早发现于1898年，1956年Robinson等*从细胞培养物中分离出支原体，之后国内外关于支原体污染细胞的报道屡见不鲜。它广泛存在于自然界中，有100余种，污染细胞chang见的支原体包括发酵支原体（M.fementans）、猪鼻支原体（M.hyorhinis）、口腔支原体（M.orale）、精氨酸支原体（M.ar... 查看详情 2020-11-19

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