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Ausbian®进口特级胎牛血清产品特点
2024-3-14
一、精选内毒素更低批次细胞对内毒素非常敏感,过高的内毒素可诱导细胞释放炎症因子、引导细胞衰老或凋亡。不仅如此,胎牛血清会经常或长时间作用于细胞,一旦内毒素含量过高,细胞相当于长期在“有在毒培养基”中生长,被内毒素影响,细胞将处于“亚健康状态”,进而影响实验结果的稳定与准确性。因此,为保证细胞的健康,在培养细胞时,应该选用内毒素含量尽可能低的血清,以保障实验的顺利进行。Ausbian®进口特级胎牛血清,选择内毒素含量≤3EU/ml,澳洲进口血源,曾经是细胞典藏等重大项目...
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如何选择适合病毒疫苗生产的新生牛血清
尽管无血清培养是疫苗生产工艺的发展趋势,但仍有许多生产细胞仍采用基础培养基+新生牛血清的培养工艺。新生牛血清营养丰富,可同时适合悬浮细胞和贴壁细胞,可为贴壁细胞提供粘附基质,细胞也无需驯化。质量较好的新生牛血清,可克服传统认为血清带来的两个不足:1.血清批次间的质量变动,带来细胞培养和实验结果的不确定性。这可通过提高每个批次的牛血清产量来部分克服。2.血清对细胞的毒性作用和血清源性污染。可通过选择低内毒素牛血清、严格外源因子的检查来解决。辐照能进一步灭活可能的残余病毒。细胞培...
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2020-11-17
提早知道所培养细胞或培养基中是否有细菌污染的一种方法
培养细胞时,要避免细菌污染。如果存在细菌污染,则培养液一般会浑浊变黄,对细胞生长影响明显,细胞大多在24小时死亡。在以细胞大规模培养为基础的生物药产业中,也需要进行无菌检查。传统无菌检查是采用TSA或TSB培养基培养的方法,一般需要培养14天,观察是否有菌落生长或溶液浑浊。现介绍一种通过PCR进行无菌检查的方法,当然该方法也是用于研究。即采用德国MB的细菌检测试剂盒(OnarBacteriaDetectionKit)。它作为PCR试剂盒,针对的是细菌高度保守的16SrRNA序...
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2020-11-17
PCR试剂盒灵敏度与方法验证概说
PCR方法已广泛用于科研,在工业中也有不断扩大应用的趋势,它包括检测一些病原体、检测支原体污染、检测细菌污染以及检测残留宿主DNA等。PCR在工业中的应用主要存在一个方法验证的问题,尤其是灵敏度的验证。灵敏度不够,就会发生漏检。另外,PCR所直接面对的样本是DNA,而非病原菌或DNA,因此还需要做DNA抽提,这也是要注意的。下面以支原体PCR检测为例,略说说灵敏度的验证。药典规定,生物药厂的主细胞库、工作细胞库、生产终末细胞、检定细胞、病毒种子批和病毒收获液、细胞培养相关材料...
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2020-11-16
支原体 DNA染色法及其优缺点
支原体有多种检查方法,其中荧光法检测支原体DNA是药典记载的方法,又被称为DNA染色法或指示细胞培养法。它的原理和操作大致如下:将供试品接种于指示细胞(无污染的Vero细胞或经国家药品检定机构认可的其他细胞,供试品应对该细胞生长无影响。下面以Vero细胞为例)中培养后,用特异荧光染料(如Hoechst33258)染色。Vero细胞经消化后,需制成每1ml含10的5次方的细胞悬液,以每孔0.5ml接种到6孔细胞培养板。每孔再加无抗生素DMEM培养基3ml,在细胞孵箱培养过夜,备...
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2020-11-16
论适血清的筛选
牛血清是重要的细胞培养添加成分,但目前牛血清的类型有胎牛血清、新生牛血清、补铁新生牛血清等,其性能和价格均不相同。胎牛血清培养效果通常来说是jia。而补铁新生牛血清对于一些细胞类型,其效果可等价于胎牛血清,或优于常规新生牛血清。三种血清价格也各不相同。适血清的选择,与各实验室、生产企业的条件和需求有关,与所培养细胞类型有关。除了以往根据经验和文献报道,必要时也可进行针对特定细胞的血清筛选试验,以筛选出jia血清。2020年8月《生物学杂志》第4期刊登了一篇《不同类型牛血清对M...
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2020-11-16
PCR检查支原体是对药典方法的重要补充
支原体是导致体外细胞污染的重要污染源。用于生物制品生产的细胞基质或治疗性细胞。产品被支原体污染后,支原体或支原体代谢产物可进入人体,并对人体产生严重危害。因此,对支原体污染的有效检测是确保细胞基质及治疗性细胞产品质量的前提。支原体传统检测方法为培养法和指示细胞染色法,这两种均是“药典方法”。但缺点是耗时长,灵敏度低。此外,这两种方法均无法明确所感染支原体的类型。因此,采用PCR或qPCR检测支原体的高度保守序列,用于制药工业的放行检测,逐渐成为一种趋势。当然,核酸扩增法也存在...
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2020-11-13
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