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Ausbian®进口特级胎牛血清产品特点
2024-3-14
一、精选内毒素更低批次细胞对内毒素非常敏感,过高的内毒素可诱导细胞释放炎症因子、引导细胞衰老或凋亡。不仅如此,胎牛血清会经常或长时间作用于细胞,一旦内毒素含量过高,细胞相当于长期在“有在毒培养基”中生长,被内毒素影响,细胞将处于“亚健康状态”,进而影响实验结果的稳定与准确性。因此,为保证细胞的健康,在培养细胞时,应该选用内毒素含量尽可能低的血清,以保障实验的顺利进行。Ausbian®进口特级胎牛血清,选择内毒素含量≤3EU/ml,澳洲进口血源,曾经是细胞典藏等重大项目...
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支原体DNA提取用试剂盒
通常,如果怀疑细胞有支原体污染,可直接取细胞上清进行支原体PCR检测。因为存在支原体污染的细胞上清中,支原体密度为通常为106-108个/ml,已足以用于PCR检测。Minverva公司生产的支原体PCR试剂盒灵敏度高,特异性好,检测的支原体种类多,很受用户的欢迎。但有时,支原体检测前,还需对样品中的支原体DNA进行提取。那么,什么时候需要提取呢?有如下几种情况。如细胞培养液中存在抑制PCR的物质,这时就需要提取。细胞培养基中的血清浓度如果超过12%,那么对下游的PCR反应会...
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2020-11-18
如何证明支原体祛除喷雾的效果
对于消毒剂,药典有抑菌效力的检查,那么对于支原体祛除喷雾,是否有对支原体祛除效果的验证呢?下面以用于常规清洁细胞培养设备的支原体祛除喷雾Mycoplasma-Off™(MinervaBiolabsGmbH)为例,说说它对支原体祛除效果的验证。首先来看支原体祛除喷雾Mycoplasma-Off™的成分,它里面含有0.05%的Mynox®。Mynox®是一种杀灭支原体的成分。它可以物理性地与支原体膜结合,改变支原体膜的通透性,从而造成支原体...
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2020-11-18
PCRdi检出限刍议
现在,PCR试剂盒常用于各种检测。其中di检出限是PCR试剂盒一个重要的参数。PCRdi检出限就是所能检测到的靶标的di值。di检出限的确定应通过定量标准品来完成。定量标准品一般是经过严格标定拷贝数的阳性DNA,梯度稀释后进行一系列的检测,每个梯度做8个复孔,终确定条带能否观测到或确定Ct值。示例.PCR定量标准品(支原体)(MinervaBiolabs)接着可用Reed-Muench公式计算方法的检测限(LOD50),lgLOD50=距离比例×稀释对数质检的差+高于50%检...
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2020-11-17
如何选择适合病毒疫苗生产的新生牛血清
尽管无血清培养是疫苗生产工艺的发展趋势,但仍有许多生产细胞仍采用基础培养基+新生牛血清的培养工艺。新生牛血清营养丰富,可同时适合悬浮细胞和贴壁细胞,可为贴壁细胞提供粘附基质,细胞也无需驯化。质量较好的新生牛血清,可克服传统认为血清带来的两个不足:1.血清批次间的质量变动,带来细胞培养和实验结果的不确定性。这可通过提高每个批次的牛血清产量来部分克服。2.血清对细胞的毒性作用和血清源性污染。可通过选择低内毒素牛血清、严格外源因子的检查来解决。辐照能进一步灭活可能的残余病毒。细胞培...
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2020-11-17
提早知道所培养细胞或培养基中是否有细菌污染的一种方法
培养细胞时,要避免细菌污染。如果存在细菌污染,则培养液一般会浑浊变黄,对细胞生长影响明显,细胞大多在24小时死亡。在以细胞大规模培养为基础的生物药产业中,也需要进行无菌检查。传统无菌检查是采用TSA或TSB培养基培养的方法,一般需要培养14天,观察是否有菌落生长或溶液浑浊。现介绍一种通过PCR进行无菌检查的方法,当然该方法也是用于研究。即采用德国MB的细菌检测试剂盒(OnarBacteriaDetectionKit)。它作为PCR试剂盒,针对的是细菌高度保守的16SrRNA序...
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2020-11-17
PCR试剂盒灵敏度与方法验证概说
PCR方法已广泛用于科研,在工业中也有不断扩大应用的趋势,它包括检测一些病原体、检测支原体污染、检测细菌污染以及检测残留宿主DNA等。PCR在工业中的应用主要存在一个方法验证的问题,尤其是灵敏度的验证。灵敏度不够,就会发生漏检。另外,PCR所直接面对的样本是DNA,而非病原菌或DNA,因此还需要做DNA抽提,这也是要注意的。下面以支原体PCR检测为例,略说说灵敏度的验证。药典规定,生物药厂的主细胞库、工作细胞库、生产终末细胞、检定细胞、病毒种子批和病毒收获液、细胞培养相关材料...
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2020-11-16
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