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Ausbian®进口特级胎牛血清产品特点
2024-3-14
一、精选内毒素更低批次细胞对内毒素非常敏感,过高的内毒素可诱导细胞释放炎症因子、引导细胞衰老或凋亡。不仅如此,胎牛血清会经常或长时间作用于细胞,一旦内毒素含量过高,细胞相当于长期在“有在毒培养基”中生长,被内毒素影响,细胞将处于“亚健康状态”,进而影响实验结果的稳定与准确性。因此,为保证细胞的健康,在培养细胞时,应该选用内毒素含量尽可能低的血清,以保障实验的顺利进行。Ausbian®进口特级胎牛血清,选择内毒素含量≤3EU/ml,澳洲进口血源,曾经是细胞典藏等重大项目...
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支原体 DNA染色法及其优缺点
支原体有多种检查方法,其中荧光法检测支原体DNA是药典记载的方法,又被称为DNA染色法或指示细胞培养法。它的原理和操作大致如下:将供试品接种于指示细胞(无污染的Vero细胞或经国家药品检定机构认可的其他细胞,供试品应对该细胞生长无影响。下面以Vero细胞为例)中培养后,用特异荧光染料(如Hoechst33258)染色。Vero细胞经消化后,需制成每1ml含10的5次方的细胞悬液,以每孔0.5ml接种到6孔细胞培养板。每孔再加无抗生素DMEM培养基3ml,在细胞孵箱培养过夜,备...
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2020-11-16
论适血清的筛选
牛血清是重要的细胞培养添加成分,但目前牛血清的类型有胎牛血清、新生牛血清、补铁新生牛血清等,其性能和价格均不相同。胎牛血清培养效果通常来说是jia。而补铁新生牛血清对于一些细胞类型,其效果可等价于胎牛血清,或优于常规新生牛血清。三种血清价格也各不相同。适血清的选择,与各实验室、生产企业的条件和需求有关,与所培养细胞类型有关。除了以往根据经验和文献报道,必要时也可进行针对特定细胞的血清筛选试验,以筛选出jia血清。2020年8月《生物学杂志》第4期刊登了一篇《不同类型牛血清对M...
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2020-11-16
PCR检查支原体是对药典方法的重要补充
支原体是导致体外细胞污染的重要污染源。用于生物制品生产的细胞基质或治疗性细胞。产品被支原体污染后,支原体或支原体代谢产物可进入人体,并对人体产生严重危害。因此,对支原体污染的有效检测是确保细胞基质及治疗性细胞产品质量的前提。支原体传统检测方法为培养法和指示细胞染色法,这两种均是“药典方法”。但缺点是耗时长,灵敏度低。此外,这两种方法均无法明确所感染支原体的类型。因此,采用PCR或qPCR检测支原体的高度保守序列,用于制药工业的放行检测,逐渐成为一种趋势。当然,核酸扩增法也存在...
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2020-11-13
DNA污染监测的一种方法
对于高灵敏的PCR技术来说,少量的DNA污染就可导致PCR假像或假阳性。污染的DNA来自于气溶胶中DNA的片段。这些气溶胶中的DNA可源自离心机、移液器和其它实验室设备,或从PCR反应管中飞溅出来。它们很难去除,并可能导致样品之间的交叉污染。在扩增过程中检测到的单个外源DNA分子,就可给整个实验过程和结果诠释带来很多问题。不幸的是,即使是经验丰富的实验室,DNA污染也会偶尔发生,并且只有当PCR检测到时,才会引起注意。值得指出的是,桌面和实验室工作区,以及分子生物学实验室中的...
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2020-11-13
哪些细胞培养时,对内毒素水平格外敏感
胎牛血清主要的作用就是提供基本的营养物质以及提供接触和伸展因子,它是采自5-8个月胎龄牛胚胎中的胎血。此时胎牛各脏器正处生长分化阶段,血中含有丰富的生长发育因子,非常适合各种细胞的培养,一旦胚胎发育*这些因子自动消失。因此8个月胎龄以上的牛胚胎,已接近足月,不能作为胎牛血清的原料来使用。有下列情况者,对血清内毒素应格外留意筛选:1.养干细胞时,干细胞对内毒素非常敏感,如果血清中内毒素≥3EU/ml时,干细胞很容易死亡。很多使用者,在血清在试用前,就通过提早审核该批次《检测报告...
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2020-11-13
细胞培养时,镜下有小黑点,怎么解决?
有些实验人员报告,细胞培养时在镜下发现有小黑点。这是有污染吗?应如何处理?一旦您在细胞培养的过程中发现有黑点生成,可采取下列步骤:首先,要肉眼观察培养基是否混浊,然后,在镜下观察培养细胞生长的状态,黑点是否游动。如果细胞被污染,微生物则会大量繁殖,培养基就会迅速变黄、变混浊。污染包括细菌污染、支原体污染等。如果在镜下观察细胞,生长状态良好,与黑点出现前相比,没有任何变化,那么,黑点的出现可能与以下几种情况有关:(1)细胞生长过老,破碎的细胞残骸;(2)血清质量不好,反复冻融的...
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2020-11-12
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