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细胞支原体污染的检测方法和预防措施

更新时间:2023-10-20  |  点击率:190
  细胞支原体污染是细胞培养过程中常见的一种污染问题。支原体是一类微生物,以细胞内寄生的方式存在,可以感染多种细胞类型,对细胞培养和实验结果产生严重影响。
  

 

  细胞支原体污染原因:
  
  1.源头污染:细胞培养实验室中使用的细胞系或原代细胞可能携带有支原体,如果没有经过筛查和消毒处理,可能会引入支原体污染。
  
  2.实验操作不当:如操作人员没有穿戴合适的个人防护设备、操作台面和器具未经消毒、容器密封不严等都可能导致支原体的传播和污染。
  
  3.检测和鉴定不准确:传统的检测方法可能无法准确鉴定细胞中的支原体,从而导致未能及时发现和处理污染。
  
  检测方法:
  
  1.PCR检测:通过扩增支原体特异性基因片段进行检测,具有高灵敏度和特异性,可以检测到低浓度的支原体污染。
  
  2.细胞培养法:将待测细胞接种至选择性培养基中,观察细胞形态和生长情况,如出现细胞变形、聚集等异常现象,可能提示存在支原体污染。
  
  3.免疫荧光染色法:利用特异性抗体与支原体抗原结合,通过荧光显微镜观察细胞中的支原体标记物,快速准确地确定支原体感染情况。
  
  4.电子显微镜观察:通过电子显微镜对细胞进行观察和分析,以发现支原体的存在和形态特征。
  
  细胞支原体污染预防控制措施:
  
  1.严格筛查源细胞:在使用细胞系或原代细胞前,对供应商提供的细胞进行详细的筛查和检测,确保无支原体污染。
  
  2.个人防护:操作细胞时,操作人员应穿戴合适的个人防护设备,如实验服、手套、口罩等,以减少污染的传播。
  
  3.器具消毒:实验室的培养器具、培养皿等应经过清洗和高温蒸汽消毒,确保无支原体残留。
  
  4.环境控制:保持实验室的空气流通和清洁,定期对操作台面、仪器设备进行消毒和清洁,减少支原体的滋生和传播。
  
  5.定期检测:采用敏感、快速和准确的检测方法,定期对实验室中的细胞系和原代细胞进行检测,早期发现和处理支原体污染。
  
  6.隔离措施:对已经检测出支原体污染的细胞进行隔离处理,防止其传播给其他细胞系或实验动物。