端粒是染色体的一部分,其研究离不开分子生物学的发展。分子生物学相关实验,对实验室的卫生环境有比较高的要求,需要达到无核酸污染的条件。德国MB公司生产的核酸污染清除试剂PCR Clean,喷雾型核酸污染清除试剂,方便高效地清除DNA、核酸酶等污染。
端粒酶,维持天然染色体末端端粒的酶。端粒酶在线性染色体末端合成端粒重复序列,允许庇护蛋白复合物结合并保护末端免受DNA损伤反应。如果端粒酶将端粒添加到断裂的DNA末端,那么位于断裂末端的基因可能会丢失。理论上,会在双链断裂(dsb)中受到抑制,在双链断裂中,新端粒的形成会导致末端截断。
近日,科研人员开发了一种检测人类细胞中Cas9或I-SceI诱导的DSBs中新端粒形成的方法。
相关研究发表在《Science》上,文章标题为:“ATR blocks telomerase from converting DNA breaks into telomeres"。
端粒酶将端粒重复序列添加到DSBs中,导致间质端粒重复插入或形成功能性新端粒并伴有末端缺失。端粒酶对基因组完整性的威胁通过失调性毛细血管扩张和rad3相关(ATR)激酶信号传导最小化,其抑制端粒酶在切除的DSBs。除了作用于切除的DSBs外,端粒酶还利用Cas9酶产物复合体中的挤压链作为新端粒形成的引物。
科研人员认为,尽管新端粒的形成在正常人类细胞中是有害的,但它可能允许癌细胞从断裂-融合-桥循环中逃脱。人类端粒酶可以作用于断裂的DNA末端,从而威胁到基因组的完整性。研究表明,端粒酶的这种基因组不稳定方面被DNA损伤反应的ATR激酶成分所避免。