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实验室使用O157显色培养基,是如何操作的

更新时间:2021-12-24  |  点击率:688
  O157显色培养基的操作步骤:
  1、按国家标准、SN标准、FDA标准或其它方法制备样品液;
  2、取25克样品液加入225mlmEC肉汤或mTSB肉汤中,36℃增菌培养18-24小时;
  3、用3mm接种环取1环增菌液,划线接种到O157菌显色培养基上,做2个平板;
  4、36℃培养18-24h,O157:H7菌显亮红色、淡红色或红色,菌落周围没有蓝色晕圈;大肠杆菌和大肠菌群显暗蓝色、蓝色或紫色,菌落周围有蓝色晕圈;其它细菌显蓝色、黄色或无色;
  5、对典型菌落可做O157:H7菌血清学试验和全套生化试验。
  注:必须在36℃培养24小时内判读结果,以免菌落颜色发生变化。
  操作
  称取瓶内干粉,用1000ml蒸馏水或纯水溶解,可按29.2g/L的比例扩大或缩小。
  将上述干粉缓慢倒入蒸馏水中,充分搅拌溶解。
  加热至100℃,并按常规不断搅拌。如果用高压灭菌锅,不要加压,加热不能超过100℃。混合物也可以在微波炉内加热,煮沸后,立即移出微波炉并轻轻搅拌,而后再移入微波炉继续加热,直至琼脂等*溶解(大量气泡代替泡沫产生,大约需要2分钟)。
  将培养基冷却至45-50℃后,倾倒于培养皿或试管中。
  注1:如果需要选择性更强的培养基,可在48℃时加入亚碲酸钾溶液,使浓度为2.5mg/l。
  注2:如果标本中含有较多的变形杆菌,可在48℃时加入头孢克肟,使其浓度为0.025mg/l。
  注3:如果标本中含有较多的假单胞菌和/或气单胞菌,可在48℃时加入西苏罗锭(头孢磺碇),使其浓度为5mg/l。