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型号:11-9025

支原体检测试剂盒qPCR (经典法)

描述:支原体检测试剂盒qPCR (经典法)是来自德国MB厂家,qPCR 是在常规PCR基础上,将『针对支原体特异性保守序列的探针』做荧光标记,使PCR扩增后的产物带有荧光,利用荧光信号的变化和配套软件,进行DNA扩增反应的实时监测,简称qPCR。

  • 厂商性质

    代理商
  • 更新时间

    2024-04-16
  • 访问量

    3454
详细介绍
品牌其他品牌供货周期一个月以上
应用领域医疗卫生,化工,生物产业,制药

支原体检测试剂盒qPCR (经典法)

Venor®Gem qEP

品名

货号

规格

价格

qPCR Kit  (经典法)

Venor®Gem qEP

11-9025

25次/盒

询价

11-9100

100次/盒

询价

11-9250

250次/盒

询价

支原体qPCR法介绍:

荧光定量PCR法(qPCR):是在常规PCR基础上,将『针对支原体特异性保守序列的探针』做荧光标记,使PCR扩增后的产物带有荧光,利用荧光信号的变化和配套软件,进行DNA扩增反应的实时监测,简称qPCR。

支原体检测试剂盒qPCR (经典法)优点:

①灵敏度高、特异性强。

②时间短,2-3小时出结果。

③检测结果可定量。

④操作简便。


缺点:

①对于已做支原体灭活处理的样品,由于支原体DNA仍旧存在其中,PCR结果会出现假阳性。(可用培养法做补充验证)

②不同厂家生产的试剂盒质量差异巨大(由于引物及内在设计不同),需谨慎选择,尽量在专业人员推荐指导下使用。


支原体检测试剂盒qPCR (经典法)介绍

德国MB公司生产的支原体qPCR检测试剂盒(均为探针法检测),依据操作步骤的细微差别,

分『经典法』和『一步法』两种。

此两类试剂盒较全球其他厂家同类产品,具有以下*的优点:

①经典法qPCR试剂盒遵循欧洲药典流程要求

②高特异性,一次检测即可涵盖了所有可能感染细胞的支原体物种(涵盖欧洲药典规定的9种支原体),根据序列一致性,至少可以检测到107种支原体物种。操作简单,易于观察。

(使用MB的试剂盒,下表中列出的支原体物种均为阳性,其他微生物或真核细胞均为阴性,无交叉反应)

③高灵敏度,MB公司的经典法试剂盒检测限可达到≤10CFU/ml。

MB公司的一步法qPCR试剂盒检测限≥50个基因组/反应。


④MB公司有相应配套的10CFU/100CFU的敏感度测试的标准品,便于方法学验证。

⑤MB公司有相应配套的支原体基因组DNA和细菌基因组DNA,便于特异性验证。

⑥MB公司有相应配套的支原体绝对定量标准品,便于最后定量检测。



qPCR Kit (经典法)特点:

1. 内控对照为独立包装,遵循欧洲药典和日本药典操作流程。

2. 高特异性,一次检测即可涵盖所有常见易感染细胞的支原体物种(包括欧洲药典规定的9种支原体)。与细菌和真核DNA无交叉反应。

3. 高灵敏度,检测限可达到≤10CFU/ml。

4. 有相应配套的支原体基因组DNA和细菌基因组DNA,便于特异性验证。

5.有相应配套的支原体绝对定量标准品,便于最后定量检测。


操作步骤:

第1步:样本处理

a.细胞培养上清

b. 生物药或需遵循药典的样本

说明:

①样品基质可能会影响检测的灵敏度。收集和筛选更高的样品量可提高测定灵敏度。

②细胞培养物样本含丰富的DNA酶,在低温下也能降解支原DNA,影响检测灵敏度。

建议:样本做DNA抽提处理,实现最高灵敏度。

推荐:德国MB公司生产的专用支原体DNA提取试剂盒

Venor® Gem Sample Preparation Kit

该DNA抽提试剂盒已经过广泛验证。


第2步:试剂制备

a. 冻干粉溶解

b. 反应体系制备

b1) 样品为细胞上清筛查——反应体系制备

b2) 样品为生物药——反应体系制备

第3步:启动荧光定量PCR仪

第4步:结果判别

FAM通道:检测支原体荧光信号。HEX通道:检测内控对照荧光信号。

支原体DNA和内控DNA存在信号的竞争性抑制。

支原体DNA越多,FAM通道信号越高,检测内控对照的HEX通道信号越低。

定量需基于Ct值和DNA标准曲线。

Ct<40为阳性结果。Ct≥40为阴性结果。

示意图:

储存条件

2~8℃保存至少12个月。复溶后-18℃以下保存。


效期

1年6个月





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